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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » PEI无血清转染悬浮293细胞不成功，求指导
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我叫崔温柔

新虫 (正式写手)

[求助] PEI无血清转染悬浮293细胞不成功，求指导 已有1人参与

我用PEI转染悬浮293细胞
培养基用freestyle
转染前一天细胞计数1*10e6cells/ml，接种在125ml摇瓶中，总体积20ml
转染当天细胞密度为2*10e6cells/ml时转染，DNA、PEI分别用freestyle培养基稀释后，复合，静置10min后，加入到摇瓶中
转染48h后观察，没有荧光，一点儿都没有
希望有悬浮转染经验的虫友提供宝贵意见及建议
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1楼 2017-11-06 17:13:31
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MC354

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我目前也在做悬浮293细胞的转染工作，共转染过两种基因，也是用的PEI，我用的线性25KD的PEI，转染方法和你的相同，我觉得问题在于基因，我自己转染的两种，一种可以检测到有表达，另外一种完全检测不到，检测的那种表达量也是特别低。
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2楼2018-03-22 09:43:38
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buled

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 我叫崔温柔 at 2017-11-06 17:13:31
我用PEI转染悬浮293细胞
培养基用freestyle
转染前一天细胞计数1*10e6cells/ml，接种在125ml摇瓶中，总体积20ml
转染当天细胞密度为2*10e6cells/ml时转染，DNA、PEI分别用freestyle培养基稀释后，复合，静置10mi ...

请问悬浮细胞的蛋白表达出来了么

发自小木虫Android客户端
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3楼2020-05-22 17:28:55
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