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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于高效液相色谱
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鲁班大师

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于高效液相色谱 已有2人参与

硕士一枚，对高效液相色谱完全不懂，身边也没有人做这个。想咨询一些简单的问题。我要在一个有机小分子上接dna，然后分离纯化。做一次实验的有机物的质量大约是60ug，dna的质量是350ug。然后是溶解在1ml dmso：水为1:1的溶剂中。这样的话我要分离是要用制备型的高效液相色谱么？还有关于流动相溶剂有没有什么要求呢？实在是不大明白，恳请各位大神不吝赐教

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1楼 2017-11-06 16:40:28
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个太笼统了，首选你可以做个紫外全波长扫描，确定你的东西在紫外区域是否有合适的吸收波长，至于流动相需要根据你物质的结构来确定配合想匹配的色谱柱来进行分离，总之方法开发一个理论和实际结合并调整优化的过程，很难说一下子就搞定。
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2楼2017-11-08 08:36:18
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snow_forest

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最好先用HPLC分析柱摸索梯度条件，一般先用水/乙腈（各含0.1%的TFA）作为流动相，两个原料做参照，考察能将产物与原料以及副产物有较好分离度的分离条件。然后再根据分析柱的条件放大到制备柱上改变梯度，制备分离。
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少年的中国没有学校，他的学校是大地和山川。
3楼2017-11-09 08:30:55
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