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细胞中mRNA原位杂交技术 已有1人参与
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细胞中mRNA原位杂交技术 实验原理及技术背景二： 原位杂交可分为菌落原位杂交和组织原位杂交。菌落原位杂交是将细菌从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上，然后将滤膜上的菌落裂解以释放DNA。将DNA烘干固定于膜上，然后将滤膜上的菌落裂菌以释放出DNA。将DNA烘干固定于膜上与32P标记的探针杂交，放射自显影检测菌落杂交信号，并与平板上的菌落对位。组织原位杂交简称原位杂交，指组织或细胞的原位杂交，它与菌落的原位杂交不同。菌落原位杂交需要裂解细菌释放DNA，然后进行杂交。而原位杂交是经适当处理后，使细胞通透性增加，让探针进入细胞内与DNA或RNA杂交。 原位杂交技术的基本方法包括：1杂交前准备，包括取材、固定、玻片和组织的处理、如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等。2杂交。3杂交后处理。4显示，包括放射自显影和非放射性标记的组织化学或免疫组织化学显色。 |
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