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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 惊奇！我的western条带为何如此的淡！！！！
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Piggy62784

新虫 (初入文坛)

[求助] 惊奇！我的western条带为何如此的淡！！！！ 已有1人参与

大家好，介绍一下，这是我刚做出来的条带。
之前做过很多次，都没有这种情况，可能是长时间不做，生疏了！
但是原因还不知道呀，蛋白上样量不少。
看网上有说是因为二抗的原因。
心情很复杂！老是催的急！
感觉再做不出来理想的样子就要屎了！
我还年轻！我想去玩游戏！不想每天熬夜了！

惊奇！我的western条带为何如此的淡！！！！


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1楼 2017-10-30 23:31:56
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xiangcx

新虫 (小有名气)
你这可能是转膜的时候没转好，有些地方可能有气泡没排出导致的

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生活不止苟且和金钱，还有自然和远方。
2楼2017-10-31 07:34:51
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Piggy62784

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiangcx at 2017-10-31 07:34:51
你这可能是转膜的时候没转好，有些地方可能有气泡没排出导致的

可是我的膜上marker挺明显的。可能是跑电泳的问题么？这个是我做的最浓的一个，上面还有一条。
惊奇！我的western条带为何如此的淡！！！！-1



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3楼2017-10-31 09:46:29
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歆予昕

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
考虑一下上样量和蛋白表达量，看看内参条带怎么样，如果内参也很淡就是上样量太低了；如果内参很亮就可以考虑一下是蛋白表达量太低了。
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4楼2017-10-31 11:02:49
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山雨1996

新虫 (初入文坛)
你做的这两次，二抗是一个公司的吗？有的二抗特异性不一样。

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5楼2018-02-13 14:23:44
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