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菌落PCR经常P出多条带。
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菌落PCR经常P出多条带。
已有1人参与
做的是植物基因克隆,在转化大肠杆菌后,挑取菌落做菌落PCR时,在目的条带下面经常有若干条类似引物二聚体(大概500bp弥散状),不知道怎么回事。
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2017-10-30 19:48:24
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专业: 化石能源储存与输送
应该是你引物的特异性不高
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2017-10-31 00:05:52
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引物特异性?
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2017-10-31 21:44:26
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2010013608
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专业: 生物物理、生物化学与分子
引物二聚体没那么大,应该是非特异性条带,你可以试着提高退火温度,如果不影响你本身条带,那就完全不用管他
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2017-11-04 10:02:17
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hi,一只小木虫
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专业: 临床分子生物学检验
设计引物时注意避免引物二聚体
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5楼
2017-11-04 10:30:11
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心死后死心
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注册: 2015-07-21
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专业: 生物物理、生物化学与分子
引物二聚体 到不了500吧 感觉是特异性问题 建议提高复性温度试试
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6楼
2017-11-15 10:50:04
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赵英0709
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专业: 生物物理、生物化学与分子
污染了吧
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7楼
2018-03-14 18:11:23
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PattyGao
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
【答案】应助回帖
引物二聚体没有500bp那么大,这是杂带,说明引物的特异性不强,如果很介意,可以重新更换引物
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8楼
2018-03-16 10:28:58
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