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宇智波希特乐

新虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR经常P出多条带。 已有1人参与

做的是植物基因克隆，在转化大肠杆菌后，挑取菌落做菌落PCR时，在目的条带下面经常有若干条类似引物二聚体(大概500bp弥散状)，不知道怎么回事。

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1楼 2017-10-30 19:48:24
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一一ab

新虫 (小有名气)
应该是你引物的特异性不高

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2楼2017-10-31 00:05:52
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前行的璐

新虫 (小有名气)
引物特异性？
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3楼2017-10-31 21:44:26
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2010013608

新虫 (初入文坛)
引物二聚体没那么大，应该是非特异性条带，你可以试着提高退火温度，如果不影响你本身条带，那就完全不用管他

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4楼2017-11-04 10:02:17
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hi，一只小木虫

新虫 (初入文坛)
设计引物时注意避免引物二聚体

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5楼2017-11-04 10:30:11
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心死后死心

铜虫 (初入文坛)
引物二聚体   到不了500吧  感觉是特异性问题   建议提高复性温度试试

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6楼2017-11-15 10:50:04
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赵英0709

新虫 (小有名气)
污染了吧

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7楼2018-03-14 18:11:23
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PattyGao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引物二聚体没有500bp那么大，这是杂带，说明引物的特异性不强，如果很介意，可以重新更换引物
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8楼2018-03-16 10:28:58
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