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汕头大学海洋科学接受调剂
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wzgen1983

金虫 (正式写手)

[交流] 酶免疫测定技术

那位高手有,杨利国, 胡少昶, 魏平华编的《 酶免疫测定技术》 南京:南京大学出版社,这本书的电子版,帮忙传一下,书店买不到。在网上读书园地有,但是拿不到邀请注册码。谢谢了。

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120101405

铁杆木虫 (正式写手)

酶免疫测定技术

    均相酶免疫测定技术

    以标记抗体检测标本中的抗原为例,按照简单的形式在试剂抗体过量的情况下进行:
Ab*+Ag—Ab*Ag+Ab*
    如在抗原抗体反应后Ab*Ag中的标记物“*”失去其特性,例如酶失去其活性,则不需要进行Ab*Ag与Ab*的分离,可以直接测定游离的Ab*量,从而间接推算出标本中的Ag含量,这种方法称为均相酶免疫测定。
    均相酶免疫测定的测定对象为小分子抗原或半抗原,主要用于药物测定。均相酶免疫测定的测定模式为竞争抑制法,酶标记的是待测抗原,检测试剂中尚有针对待测抗原的抗体和酶的底物。与抗体结合的酶就失去其活力,因此在反应中无需分离结合的酶与游离的酶即可进行测定。其反应过程与一般的生化测定无异,因此可直接用自动生化分析仪进行测定。均相酶免疫测定主要有酶扩大免疫测定技术和克隆酶供体免疫测定两种。

    异相酶免疫测定技术

    酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂进行检测的方法,是标记免疫技术的一种,1966年Nakene和Pierce利用酶使底物显色的作用而得到与荧光抗体技术相似的结果,20世纪70年代初,酶标抗体技术开始应用于免疫测定,其后得到迅速发展。近年来标记免疫技术飞速发展,应用不同标记物,根据不同原理、不同技术建立起来的检测方法层出不穷。
    酶免疫测定(enzymeimmunoassay,EIA)是以酶作为标记物的免疫测定方法,利用酶的高效催化作用提高检测的敏感度。根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物,酶免疫测定可分为均相(homogenous)和异相(heterogenous)两种类型。
    相对于均相酶免疫测定技术,异相酶免疫测定在医学检验应用更为广泛,其反应过程中需经过结合标记物和游离标记物的分离才能进行测定。分离的方法主要借助固相载体,即将一种反应物固定在固相载体上,当另一种反应物与之结合后,可通过洗涤、离心等方法令其与液相中的其他物质分离,此类反应亦称为固相酶免疫测定。Engvall和Perimann于20世纪70年代初首先建立这种方法,称之为ELISA。所谓的免疫吸附剂指的是吸附在固相载体上的免疫活性物质ELISA在临床及科研中应用极为广泛,已成为固相酶免疫测定的代名词。

    固相酶免疫测定方法

    固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应;用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例;加入酶反应的底物后,底物被酶催化显色,故可根据颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,具有放大反应的效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。根据测定对象的不同,ELISA有多种反应类型

看看是不是需要这方面的资料?
谦逊求教才能更进一步
4楼2009-02-27 09:55:12
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120101405

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
wzgen1983(金币+5,VIP+0):给予帮助 2-26 22:34
liu2004m(金币+0,VIP+0):请及时提供给相应的资料,谢谢! 3-1 20:22
我有
怎么给你?
谦逊求教才能更进一步
2楼2009-02-21 15:07:05
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wzgen1983

金虫 (正式写手)

谢谢!不好意思,前几天因为上课,没有上网,拖了几天才能给你恢复。我的QQ是283898123.邮箱是s0830507@163.com.如果不是很大的话,你就发到我的邮箱里吧,如果比较大,你加我为好友,用qq传吧。谢谢了!因为我的积分很少,只有6个金币给你,不好意思了。
3楼2009-02-26 22:39:26
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wzgen1983

金虫 (正式写手)

不对吧,我说的是书啊。
5楼2009-02-27 17:21:13
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