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yedansky

新虫 (著名写手)


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trizol法提RNA,反转录成cDNA,以其为模板,PCR扩增,回收条带。连接p-blunt后,测序,测序结果显示与基因组序列一致,但是序列中明明有终止密码子。这是怎么回事?怀疑可能有DNA的污染,重新转blunt,重新挑转化子测序,结果依旧如此,这是为什么?请求虫友们帮忙分析

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yedansky

新虫 (著名写手)


引用回帖:
1楼: Originally posted by yedansky at 2017-10-27 19:32:36
trizol法提RNA,反转录成cDNA,以其为模板,PCR扩增,回收条带。连接p-blunt后,测序,测序结果显示与基因组序列一致,但是序列中明明有终止密码子。这是怎么回事?怀疑可能有DNA的污染,重新转blunt,重新挑转化子 ...

大家拿走红包后没有什么要说的么?

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17楼2017-10-27 19:56:26
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酷莱博

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我对这个不太懂,提供一点思路,建议用DNase I处理一下RNA,免除这个干扰相。基因组,mRNA和cDNA的联系,我有点缕不清。最后mRNA序列还是基因组序列一致。。。

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20楼2017-10-28 20:21:09
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wguo2楼
2017-10-27 19:32   回复  
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pandongzi4楼
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adamge8楼
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xiaobao319楼
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KDME12楼
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Thomas_Lo14楼
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M塞北15楼
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