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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RT-PCR+P-easy blunt
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yedansky

新虫 (著名写手)
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trizol法提RNA，反转录成cDNA，以其为模板，PCR扩增，回收条带。连接p-blunt后，测序，测序结果显示与基因组序列一致，但是序列中明明有终止密码子。这是怎么回事？怀疑可能有DNA的污染，重新转blunt，重新挑转化子测序，结果依旧如此，这是为什么？请求虫友们帮忙分析

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1楼 2017-10-27 19:32:36
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yedansky

新虫 (著名写手)
引用回帖:
1楼: Originally posted by yedansky at 2017-10-27 19:32:36
trizol法提RNA，反转录成cDNA，以其为模板，PCR扩增，回收条带。连接p-blunt后，测序，测序结果显示与基因组序列一致，但是序列中明明有终止密码子。这是怎么回事？怀疑可能有DNA的污染，重新转blunt，重新挑转化子 ...

大家拿走红包后没有什么要说的么？

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17楼2017-10-27 19:56:26
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酷莱博

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我对这个不太懂，提供一点思路，建议用DNase I处理一下RNA，免除这个干扰相。基因组，mRNA和cDNA的联系，我有点缕不清。最后mRNA序列还是基因组序列一致。。。

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20楼2017-10-28 20:21:09
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wguo2楼
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pandongzi4楼
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天涯明月20166楼
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adamge8楼
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xiaobao319楼
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旋雪旋雪10楼
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KDME12楼
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小小小虫牙13楼
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Thomas_Lo14楼
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M塞北15楼
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碎碎小叶18楼
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xiaoyezi041919楼
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