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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 国产和进口的ELISA试剂盒互测
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GabyCare

新虫 (小有名气)

[交流] 国产和进口的ELISA试剂盒互测 已有3人参与

小白一枚，使用国产和进口的ELISA试剂盒，分别进行互测，发现国产的试剂盒只能检测到国产的标准品，进口的试剂盒只能检测出进口的标准品，请大神帮忙分析一下，为什么会这样？
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1楼 2017-10-26 09:33:02
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
★
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问题可能出在标准品上，两个试剂盒的标准品可能不太一样，你查查有没有单独的第三方标准品卖的
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2楼2017-10-26 09:45:51
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GabyCare

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yyy0305 at 2017-10-26 09:45:51
问题可能出在标准品上，两个试剂盒的标准品可能不太一样，你查查有没有单独的第三方标准品卖的

那有没有可能是因为国产和进口的二者的纯净度或者是洗涤液等的不同导致？
而且我们检测了3个不同的样本——处理的THP-1、正常的THP-1和HT-29，国产的3种都能检出，且吸光度数值上相差不大，处理的THP-1数值是三者中最小；而进口的只能检出处理的THP-1，其他两个样本均不检出。这样的结果能否表明国产的有较高的假阳性率？
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3楼2017-10-27 10:34:49
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by GabyCare at 2017-10-27 10:34:49
那有没有可能是因为国产和进口的二者的纯净度或者是洗涤液等的不同导致？
而且我们检测了3个不同的样本——处理的THP-1、正常的THP-1和HT-29，国产的3种都能检出，且吸光度数值上相差不大，处理的THP-1数值是三者 ...

有这个可能出现假阳性，ELISA实验出现非特异吸附信号的概率还是很大的，国产的试剂盒这方面的验证工作不一定做全了。当然还得看具体的实验数据的信号差异有多大了。洗涤液如果不是样品比较特殊，一般影响不大的。
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4楼2017-10-27 10:48:00
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xumanwang

新虫 (初入文坛)
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试剂盒标准品用的大多是重组蛋白，国产和进口的进行互测测不到是很正常的，因为两个品牌用的重组蛋白构象不一样，抗体对识别的表位也就不一样；
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世界不缺少美，缺少的是发现
5楼2017-12-13 14:05:42
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xumanwang

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by GabyCare at 2017-10-27 10:34:49
那有没有可能是因为国产和进口的二者的纯净度或者是洗涤液等的不同导致？
而且我们检测了3个不同的样本——处理的THP-1、正常的THP-1和HT-29，国产的3种都能检出，且吸光度数值上相差不大，处理的THP-1数值是三者 ...

验证是否是假阳性，可以将样本进行2-3个系列梯度稀释分别进行检测，看看是否成线性
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世界不缺少美，缺少的是发现
6楼2017-12-13 14:11:24
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rtadx15

金虫 (初入文坛)
标准品有问题？
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7楼2017-12-14 01:32:27
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