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cruise0303

新虫 (初入文坛)

[交流] 分离度不好 怎么办

用的是c18 5cm长的柱子,流动相是A:0.17%十二烷基磺酸钠 B:甲醇 梯度洗脱如下 254nm检测

时间         甲醇    比例
0.01  Pumps  B.Conc  15
0.01  Controller  Start  
5.00  Pumps  B.Conc  15
10.00  Pumps  B.Conc  20
20.00  Pumps  B.Conc  30
21.00  Pumps  B.Conc  45
26.00  Pumps  B.Conc  50
38.00  Pumps  B.Conc  70
48.00  Pumps  B.Conc  80
50.00  Pumps  B.Conc  90
58.00  Pumps  B.Conc  90
60.00  Pumps  B.Conc  60
65.00  Pumps  B.Conc  40
68.00  Pumps  B.Conc  15
70.00  Pumps  B.Conc  15
70.01  Controller  Stop  
色谱图在附件里,在保留时间18.599,19.415,20.009的峰老是分不开,还有25.932和25.575的峰也分不开。这些都是吲哚类生物碱。 还有基线老是漂移。很头痛

请教高手们,有什么办法能把他们分开?谢谢~~

[ Last edited by 佳怡 on 2009-2-22 at 08:20 ]
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嘉木

金虫 (正式写手)

LZ,你还是直接贴图吧
不然我要回答你的问题还要消耗金币看你的附件
2楼2009-02-21 19:06:32
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yixiantian5089

同意楼上的说法 我还没有啥金币呢
3楼2009-02-21 19:37:31
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zhangwq

金虫 (著名写手)

调节甲醇的梯度


wingcat(金币+1,VIP+0):谢谢。 2-22 22:47
建议10-20min甲醇比例设为18%,20-30Min甲醇比例调为18%-30%。
4楼2009-02-22 13:05:10
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hd1113

木虫 (小有名气)

烷基磺酸钠缓冲来走梯度肯定基线不稳定,而且强烈的影响你的分离度和重现性,柱子都没有稳定怎么可能分得开
5楼2009-02-24 15:46:54
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hd1113

木虫 (小有名气)

★ ★
jsys(金币+2):感谢应助,希望多多贡献你的一份力啊。
建议你用磷酸氢二钠调调ph值,然后再用你的梯度试一下
6楼2009-02-24 15:48:36
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libbi12309

新虫 (初入文坛)


jsys(金币+1):感谢应助,希望多多贡献你的一份力啊。
不知道你柱的性能怎样,谱图上看不太好,走空白样看基线能不能走平,再试用上面的方法调试。建议有时间的话用甲醇多冲冲柱子
7楼2009-02-24 16:56:51
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cruise0303

新虫 (初入文坛)

谢谢大家的热心帮忙!
8楼2009-02-24 21:28:14
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godspeed285

铜虫 (小有名气)


佳怡(金币+1,VIP+0):感谢应助~ 2-26 12:39
现实中梯度洗脱本来基线就是不平的,楼主建议你把空白基线扣除后发个图上来。
9楼2009-02-25 17:02:28
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