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qingxiong

木虫 (正式写手)


[资源] DNA提取原理

酚氯仿法提取DNA的原理
用酚抽提细胞DNA时,有什么作用?

使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。
使用酚的优点:1.有效变性蛋白质;2抑制了DNase的降解作用。缺点:1.能溶解10-15%的水,从而溶解一部分poly(A)RNA。2.不能完全抑制RNase的活性。

氯仿的作用?

氯仿:克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。
最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中)

用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?

异戊醇:减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

用乙醇沉淀DNA时,为什么加入单价的阳离子?

用乙醇沉淀DNA时,通常要在溶液中加入单价的阳离子,如NaCl 或 NaAc,Na+中和DNA分子上的负电荷,减少DNA分子之间的同性电荷相斥力,而易于聚集沉淀。
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qgaoamtf

至尊木虫 (职业作家)


Sehr shoen!
2楼2009-02-20 17:24:19
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greenspringmi

银虫 (正式写手)


受益啦,谢谢啦
3楼2009-02-24 10:48:39
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ymmno6

铁杆木虫 (正式写手)


不错 分享了
4楼2009-02-25 10:15:47
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jiangqq5238

铜虫 (小有名气)


原理搞清楚了,才能心中有数。
很好,收了。谢谢
5楼2009-02-26 16:01:16
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churmi

银虫 (正式写手)


受益啊!
6楼2009-08-06 13:57:02
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juliet8338

新虫 (初入文坛)


好好好 好东西
7楼2009-09-13 22:38:10
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xhlxhl

木虫 (正式写手)


简单,明了 好东东~~
8楼2009-09-14 00:48:09
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9528

至尊木虫 (职业作家)


谢谢学习了 佩服这些发现这些方法的人

[ Last edited by 9528 on 2009-11-1 at 10:16 ]
9楼2009-11-01 10:14:50
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daifeng

银虫 (小有名气)


谢谢 学习了
10楼2009-11-16 11:05:51
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qqsvery

木虫 (著名写手)


★★★★★ 五星级,优秀推荐

很明了!很适合本科四年级学生学习分子生物学入门!大家好像很吝啬评分,我来鼓励下吧!
11楼2009-11-20 17:19:48
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liuhua703

木虫 (正式写手)


★★★★★ 五星级,优秀推荐

学习学习!!!!!11
12楼2009-11-21 13:12:58
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ymjxl123

木虫 (著名写手)


好的 值得转录
13楼2009-11-28 13:20:46
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大白菜123789

铜虫 (小有名气)


很有道理啊
14楼2009-11-28 14:22:05
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7788945

银虫 (小有名气)


顶下此贴
15楼2009-11-28 15:09:40
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高海洁

新虫 (初入文坛)


貌似实验室都有记录
16楼2009-12-07 00:12:02
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陈思容

铜虫 (正式写手)


为什么我提不出来呢
17楼2009-12-07 10:50:41
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axiaoru


引用回帖:
Originally posted by qingxiong at 2009-2-20 16:02:
酚氯仿法提取DNA的原理
用酚抽提细胞DNA时,有什么作用?

使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子 ...

RNA的也一样吧?
18楼2009-12-07 12:58:31
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咖啡杯

金虫 (小有名气)


★★★ 三星级,支持鼓励

不错  做了好多次了 知道的不是很多呢
19楼2009-12-07 13:33:18
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