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氧气是你

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质和一个化合物反应已有1人参与

就是我在测一个化合物和蛋白质溶液的反应后的吸光度,但是用蒸馏水配的蛋白质测出来的曲线刚刚好,为什么用ph为7.3的pbs缓冲溶液配的蛋白质溶液反应时候,我加入了化合物之后马上测吸光度有一个峰,再等一会测这个峰值会降低,再多等一会这个峰值又会上升最后不怎么变化了,这是为什么啊?而且我一开始加化合物的时候峰值变化不大,后面依次加到差不多第五次化合物的时候曲线的峰飙升,有大佬知道这是为什么吗?求帮助    我没有金币  穷

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tongganggang

金虫 (初入文坛)

pH值变化引发蛋白质构象变化
2楼2017-10-24 01:15:46
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氧气是你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tongganggang at 2017-10-24 01:15:46
pH值变化引发蛋白质构象变化

7.3的ph不是模拟人体环境吗  这里没有变性吧

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3楼2017-10-24 07:47:30
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Dr_Jesse

铁杆木虫 (著名写手)

沧海一粟,浩宇星尘

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不同的酰胺基结构在不同pH中response是不同的,所以可以利用他们做很多pH响应性材料。pH=7.3让蛋白质变性不至于,但引起共轭结构变化,导致一个吸收峰出现异常还是有可能的。做一个空白试验吧,别用蒸馏水做曲线了,直接用7.3的溶液单配蛋白质测,一目了然
除了你自己,没有人能够阻挡你!
4楼2017-10-24 08:13:30
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氧气是你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Dr_Jesse at 2017-10-24 08:13:30
不同的酰胺基结构在不同pH中response是不同的,所以可以利用他们做很多pH响应性材料。pH=7.3让蛋白质变性不至于,但引起共轭结构变化,导致一个吸收峰出现异常还是有可能的。做一个空白试验吧,别用蒸馏水做曲线了, ...

我是用的7.3的pbs缓冲溶液配的牛血清蛋白     就是反应一开始我扫出来是一个峰   过一会峰值会变低   每次加的化合物的量都是一样的  但是第一次的峰变化很小  后面变化越来越大   这是为什么啊   我每次加的都是一样的  变化的趋势不该是一样的吗

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5楼2017-10-24 08:18:24
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Dr_Jesse

铁杆木虫 (著名写手)

沧海一粟,浩宇星尘

【答案】应助回帖

你配好溶液后是不是等充分溶解或者说分散了以后再测的?大分子(生物大分子)在溶剂中让自己完全舒展需要时间
除了你自己,没有人能够阻挡你!
6楼2017-10-24 08:19:45
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氧气是你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by Dr_Jesse at 2017-10-24 08:19:45
你配好溶液后是不是等充分溶解或者说分散了以后再测的?大分子(生物大分子)在溶剂中让自己完全舒展需要时间

嗯嗯  我每次让它反应很久的  反应到后面峰高还在降低   而且加到第五次以后峰高会明显增高  我不知道是为什么   跟前几条峰变化明显不一样

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7楼2017-10-24 08:37:54
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Dr_Jesse

铁杆木虫 (著名写手)

沧海一粟,浩宇星尘

引用回帖:
7楼: Originally posted by 氧气是你 at 2017-10-24 08:37:54
嗯嗯  我每次让它反应很久的  反应到后面峰高还在降低   而且加到第五次以后峰高会明显增高  我不知道是为什么   跟前几条峰变化明显不一样
...

温度?
除了你自己,没有人能够阻挡你!
8楼2017-10-24 08:45:17
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氧气是你

新虫 (初入文坛)

都是常温反应的啊   ph为7.3 和7.4差别大吗  对于蛋白质溶液来说?

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9楼2017-10-24 08:47:09
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氧气是你

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Dr_Jesse at 2017-10-24 08:45:17
温度?...

都是常温反应的啊

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10楼2017-10-24 09:19:17
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