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cxbaoa

金虫 (正式写手)

[交流] 继续求助高效液相色谱问题测定药物浓度的方法问题

已经求助过一遍了,现在实验开始了有了新的问题继续求助大家!
以前的帖子的大体意思
做试验(抗癌药物异环磷酰胺在无机吸附剂上的吸附)需要测药物随时间在溶液中浓度变化,以前课题组都用紫外,做出标准曲线即可,但是我的药物存在紫外末端吸收,因此数据老是不对头忽大忽小,因此考虑用高效液相色谱测浓度。也有此药的文献,但都是医学方面测其在血清中浓度,但我的实验目的很简单,就是测这个药(原料药)在水溶液中的浓度(没有其他的东西),那么我该怎么做呢?(那也不存在对照品供试品等称呼了吧)我自己想的是,可不可以将系列浓度溶液进样先做出浓度-面积工作曲线,然后将需要测的样进样之后,根据峰面积带入标准曲线求即可? 大家已经回答了以上疑惑。

现在试验刚刚开始做,发现的问题是
1在主峰前面有两个小峰,同学说是因为我的溶剂是水,与流动相(乙腈水)不同产生的噪音,这样解释合理吗?
2保留时间在乙腈:水=35:65时为四分钟左右,是不是可以调整流动相比例使出峰时间在五六分钟,这样结果会更准确?
3药物浓度在10-5000mg/l都可以测到,做标准曲线的话应该取在哪个范围?
低于10mg/l怎么只有前面的那两个峰了,主峰就不见了(文献中提到最低检测限0.5mg/l呢),为什么我的灵敏度就不行了呢?(仪器型号岛津LC-10AVP,紫外检测器SPD-10AVP,柱型号ALIGENT-ECLIPSE XDB-C18)
4外标法(标准曲线法)大家认为准确度可以吧?还有别的好方法吗?
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淡淡欢喜淡淡愁
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chgli1981

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
cxbaoa(金币+4,VIP+0):谢谢了啊 2-22 08:38
1,你可以单独进一阵水看一下
2是的
3你应该先做一下检出限再确定现行范围
4如果是体内分析的话,可以考虑用内标发法
2楼2009-02-20 13:45:28
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桂桂5708

木虫 (著名写手)

帖子真精彩!
已经收录到淘贴专辑《HPLC
慷慨丈夫志,生当忠孝门,为官须做相,及第必争先.
3楼2011-08-31 14:39:42
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