24小时热门版块排行榜    

查看: 4064  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

RyanKai

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌RNA提取 已有3人参与

第一泳道是5000Marker,第二泳道是我提的RNA,提取方法是用trizol,提成这样可以做qPCR吗?OD比例不是很好,OD260/OD280只有1.56

细菌RNA提取


@youlinglyw @biostar2009 发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是的,细菌做qPCR也要先提RNA,然后反转录后CDNA才能做.楼主你这个应该是所提取到的RNA里面有杂质,这样做qPCR结果不一定能好,我建议你重提。我们实验室用BIODAI技术提取到的RNA紫外值一般在1.9左右
9楼2019-03-18 08:52:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

山里的猫先森

新虫 (小有名气)

有DNA污染??最后用DNA酶处理下试试
2楼2017-10-24 08:43:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

RyanKai

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 山里的猫先森 at 2017-10-24 08:43:49
有DNA污染??最后用DNA酶处理下试试

你好,我想问一下细菌做qPCR是不是也要提RNA,然后反转录后才能做?

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-10-24 11:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinweistu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-27 07:48:09
你的RNA完整性还可以,260/280比值偏低,应该是你吸取RNA水相的时候吸到了酚氯仿等有机物杂质,有可能会影响扩增。
细菌做qPCR看你要做什么了,RNA模板肯定要反转录啊
4楼2017-10-26 10:16:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见