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RyanKai

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌RNA提取 已有3人参与

第一泳道是5000Marker,第二泳道是我提的RNA,提取方法是用trizol,提成这样可以做qPCR吗?OD比例不是很好,OD260/OD280只有1.56

细菌RNA提取


@youlinglyw @biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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摩天轮711

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以用试剂盒试试呢,且TRIZOL提的好坏跟个人经验有关。可能效果不好。且苯酚氯仿气味很大。用试剂盒可以减少对个人操作能力的要求,还可以减少手提中各种有毒试剂对身体的毒害。省时省力,提出来的rna的量有保证!如果不缺经费的话就用试剂盒提吧,凯杰QIAGEN,天根TIANGEN,百代BIOG都是常用的。
8楼2018-12-10 16:04:35
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山里的猫先森

新虫 (小有名气)

有DNA污染??最后用DNA酶处理下试试
2楼2017-10-24 08:43:49
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RyanKai

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 山里的猫先森 at 2017-10-24 08:43:49
有DNA污染??最后用DNA酶处理下试试

你好,我想问一下细菌做qPCR是不是也要提RNA,然后反转录后才能做?

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-10-24 11:42:32
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jinweistu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-27 07:48:09
你的RNA完整性还可以,260/280比值偏低,应该是你吸取RNA水相的时候吸到了酚氯仿等有机物杂质,有可能会影响扩增。
细菌做qPCR看你要做什么了,RNA模板肯定要反转录啊
4楼2017-10-26 10:16:33
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