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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 求助高效液相双波长基线不平的问题
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yye1399

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助高效液相双波长基线不平的问题 已有2人参与

文献里用的215nm，基线是平的，我用的双波长，215nm的总是在10.5有个峰，之后基线就陡然升高了，但是在相应的254nm里基线就比较平，请问这是怎么回事，怎么调整啊?

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1楼 2017-10-23 10:23:27
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wslm8624

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by yye1399 at 2017-10-23 16:02:29
流动相是千分之一甲酸和乙腈，0-20min:15%乙腈-80%乙腈，20-25min:100%乙腈，做的几组都是这种情况。
...

建议更换流动相，不要用甲酸。查了下资料，甲酸在260nm以下的吸收都很大，走出来的基线很容易随梯度波动，所以甲酸一般不用于LC-UV的流动相。如果加甲酸是为了调节流动相pH值，可以替换为磷酸等无机酸。
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11楼2017-10-24 07:52:18
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yye1399

新虫 (初入文坛)
求助高效液相双波长基线不平的问题

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2楼2017-10-23 10:26:44
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yye1399

新虫 (初入文坛)
求助高效液相双波长基线不平的问题-1

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3楼2017-10-23 10:27:54
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yye1399

新虫 (初入文坛)
第一个215nm，第二个254nm

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4楼2017-10-23 10:28:10
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wslm8624

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你用的什么作流动相？215nm比较低，流动相梯度变化较大时可能会影响基线。用254nm时流动相吸收不明显，所以基线好很多。
另外，你多次进样的基线重现性如何？看你254nm走的图，基线也不算好，可能柱子或仪器有污染，建议用95%水相-100有机相梯度冲洗系统。
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5楼2017-10-23 14:10:29
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yye1399

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wslm8624 at 2017-10-23 14:10:29
你用的什么作流动相？215nm比较低，流动相梯度变化较大时可能会影响基线。用254nm时流动相吸收不明显，所以基线好很多。
另外，你多次进样的基线重现性如何？看你254nm走的图，基线也不算好，可能柱子或仪器有污染 ...

流动相是千分之一甲酸和乙腈，0-20min:15%乙腈-80%乙腈，20-25min:100%乙腈，做的几组都是这种情况。

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6楼2017-10-23 16:02:29
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)
低波长下溶剂产生的峰
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铁甲依然在
7楼2017-10-23 21:03:45
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繁夏

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主
你这个纵坐标很小，还可以

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8楼2017-10-23 21:33:40
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yye1399

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 繁夏 at 2017-10-23 21:33:40
你这个纵坐标很小，还可以

可以具体些吗，不懂，我是新手小白，谢谢啦

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9楼2017-10-23 21:49:28
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yye1399

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2017-10-23 21:03:45
低波长下溶剂产生的峰

麻烦您可以具体些吗?不懂，感谢您。

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10楼2017-10-23 21:49:53
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