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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 想对真菌做qPCR 应该怎样得到它的目的片段
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睡不醒的人

新虫 (初入文坛)

[求助] 想对真菌做qPCR 应该怎样得到它的目的片段 已有4人参与

用16SrRNA还是16SrDNA ，是从总的DNA 中提取，还是用rRNA反转录。用通用引物可以吗？

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1楼 2017-10-22 12:43:53
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cf沐晴

新虫 (正式写手)
真菌不是18么？本人外行。

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2楼2017-10-22 13:31:17
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睡不醒的人

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cf沐晴 at 2017-10-22 13:31:17
真菌不是18么？本人外行。

是的是的，写错了，细菌是16

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3楼2017-10-23 13:12:07
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饭团团529

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 睡不醒的人 at 2017-10-22 12:43:53
用16SrRNA还是16SrDNA ，是从总的DNA 中提取，还是用rRNA反转录。用通用引物可以吗？

我最近也在做，不知道你做到哪一步了，我刚把引物合成出来，过两天提DNA试试引物行不行，可以互相交流一下呀

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4楼2017-11-01 15:05:15
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boy2006

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
snoopytbw: 金币+2, 热心应助，鼓励 2017-12-07 10:27:17
可以用ITS序列，ITS1/ITS1F    ITS1/ITS4...
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5楼2017-11-02 14:29:30
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小马科研部落

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
snoopytbw: 金币+2, 热心应助，鼓励 2017-12-07 10:27:22
如果是用荧光定量PCR做真菌的单位拷贝数，提总DNA，然后用扩ITS的引物，对ITS1进行扩增。
16S rDNA只是检测细菌的。
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更多内容，请关注微信公众号【小马科研部落】，有问题可找QQ308091253
6楼2017-12-06 15:44:26
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美亿美生物

捐助贵宾 (职业作家)

技术服务-实验代做

【答案】应助回帖

提取总DNA，进行扩增
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7楼2017-12-07 10:17:44
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whsds123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

对于QPCR 得到的拷贝数和传统的菌落计数你们是如何转换的
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8楼2018-08-24 16:12:25
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