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luck12345678

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切位点选择不好会不会影响后期的目的基因同载体连接?

大神大神,求助大神,,,我构建超表达载体时。载体酶切好了,目的基因也好了,连接的应该也行。同一批的给同学做的也出来了,,,就是自己的这个,转了大肠杆菌后。毛都没长,,,到底咋回事啊,。,是不是酶切位点也会影响后期的连接?????好气啊。。。。。。。。!!!!!!!!!

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hi,一只小木虫

新虫 (初入文坛)

这个肯定会影响的,你后续的实验如果构建的载体上也有相同的酶切位点的话,你的酶会切两次,可能其中有一次切的那个并不是想要的

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2楼2017-10-21 20:25:28
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luck12345678

新虫 (小有名气)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by hi,一只小木虫 at 2017-10-21 20:25:28
这个肯定会影响的,你后续的实验如果构建的载体上也有相同的酶切位点的话,你的酶会切两次,可能其中有一次切的那个并不是想要的

切的条带没有问题的,跑胶验证了的,就是连不上。。。

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3楼2017-10-21 20:54:58
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