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pcr引物设计 已有1人参与
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虫友们,大家好,现在要将一个质粒上的20bp替换成自己的目的片段(也是20bp),载体上的部分序列如下: 5‘tctttgaaaagataatgtatgattatgctttcactcatatttatacagaaacttgatgttttctttcgagtatatacaaggtgattacatgtacgtttgaagtacaactctagattttgtagtgccctcttgggctagcggtaaaggtgcgcattttttcacaccctacaatgttctgttcaaaagattttggtcaaacgctgtagaagtgaaagttggtgcgcatgtttcggcgttcgaaacttctccgcagtgaaagataaatgatc GAGTGCCCTAGTCGGTGTGAGAGTGCCCTAGTCGGTGTGAGTTTTAGAGCTAGAAATAGCAAGTTAAAATAAGGCTAGTCCGTTATCAACTTGAAAAAGTGGCACCGAGTCGGTGGTGCTTTTTT 3’ GAGTGCCCTAGTCGGTGTGA 是我要替换掉的序列,通过pcr 我的目的片段是 GATACATGATGCGCAGTCCG 引物 F 5‘ GCAGTGAAAGATAAATGATC GATACATGATGCGCAGTC 3‘(载体上游序列20bp+目的片段18bp) R 5’GCTATTTCTAGCTCTAAAACCGGACTGCGCATCATGTA 3’((目的片段18bp+载体下游序列20bp) 的反向互补序列 ) 请问我这样设计可以吗? |
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2楼2017-10-19 15:53:12
日光海
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
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- 注册: 2013-08-23
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
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质粒上基因替换的话建议用试剂盒来做,那你可以参照这个试剂盒说明http://www.tiangen.com/asset/imsupload/up0031255001467248969.pdf 此外,其他公司也有很多这个功能的试剂盒 |

3楼2017-10-19 16:43:06










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