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pcr引物设计 已有1人参与
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虫友们，大家好，现在要将一个质粒上的20bp替换成自己的目的片段（也是20bp），载体上的部分序列如下： 5‘tctttgaaaagataatgtatgattatgctttcactcatatttatacagaaacttgatgttttctttcgagtatatacaaggtgattacatgtacgtttgaagtacaactctagattttgtagtgccctcttgggctagcggtaaaggtgcgcattttttcacaccctacaatgttctgttcaaaagattttggtcaaacgctgtagaagtgaaagttggtgcgcatgtttcggcgttcgaaacttctccgcagtgaaagataaatgatc GAGTGCCCTAGTCGGTGTGAGAGTGCCCTAGTCGGTGTGAGTTTTAGAGCTAGAAATAGCAAGTTAAAATAAGGCTAGTCCGTTATCAACTTGAAAAAGTGGCACCGAGTCGGTGGTGCTTTTTT 3’ GAGTGCCCTAGTCGGTGTGA 是我要替换掉的序列，通过pcr 我的目的片段是 GATACATGATGCGCAGTCCG 引物 F 5‘ GCAGTGAAAGATAAATGATC GATACATGATGCGCAGTC 3‘（载体上游序列20bp+目的片段18bp) R 5’GCTATTTCTAGCTCTAAAACCGGACTGCGCATCATGTA 3’（(目的片段18bp+载体下游序列20bp） 的反向互补序列 ) 请问我这样设计可以吗？ |
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2楼2017-10-19 15:53:12
日光海
铜虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1508.7
- 红花: 1
- 帖子: 87
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- 虫号: 2612459
- 注册: 2013-08-23
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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质粒上基因替换的话建议用试剂盒来做，那你可以参照这个试剂盒说明http://www.tiangen.com/asset/imsupload/up0031255001467248969.pdf 此外，其他公司也有很多这个功能的试剂盒 |
3楼2017-10-19 16:43:06
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