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aeolian1985

木虫 (小有名气)

[交流] [其他分析]有关液体核磁测蛋白构象

请教高手 高分辨液体核磁测蛋白质构象的方法?

我的蛋白使用的是E.coli表达体系,请问蛋白样品要满足怎样的条件,同位素标记蛋白应该如何表达纯化,蛋白缓冲溶液盐浓度过高对测定有影响吗?(我的蛋白缓冲溶液有5M的NaCl,还有PBS和DTT)
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0202liuyan

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
zxz.1982(金币+2,VIP+0):感谢交流 12-7 12:41
aeolian1985(金币+2,VIP+0):谢谢 12-9 16:01
首先蛋白需要纯度很高,核磁反映蛋白的立体结构信息,所以打核磁前应保证蛋白没有变性,将蛋白纯化冻干后用D2O或氘代盐酸溶解,一般没什么问题。
还有,蛋白构象的测定一般需要高分辨核磁,Buffer浓度过高如果引起蛋白不可逆损伤,会导致测定结果不属实
2楼2009-12-07 11:32:17
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