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汕头大学海洋科学接受调剂
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张锡晨

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于crispr载体的构建 已有1人参与

在构建crispr载体时, 20bp的选择要求序列后面有个PAM序列,即NGG。
而在设计sgRNA时,把ngg也加进去了,会有什么影响?
麻烦问下各位

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yuzhiming

捐助贵宾 (知名作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-18 07:42:58
感觉就相当于你的NGG成为了靶序列了。NGG后面还有NGG存在,那可能还能工作。如果不存在的话,估计就不能工作了。个人意见,未必正确。

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2楼2017-10-17 21:52:32
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liuxiaofei

铁虫 (小有名气)

没有影响,我刚开始也设计进去了,没事的

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3楼2017-11-17 14:58:29
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志者竟成

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuxiaofei at 2017-11-17 14:58:29
没有影响,我刚开始也设计进去了,没事的

Crispr构建载体,容易吗?

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4楼2018-03-01 13:07:03
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liuxiaofei

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 志者竟成 at 2018-03-01 13:07:03
Crispr构建载体,容易吗?
...

跟普通载体构建一样的,应该说比普通载体还好连接,因为片段短

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5楼2018-03-01 13:08:18
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志者竟成

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by liuxiaofei at 2018-03-01 13:08:18
跟普通载体构建一样的,应该说比普通载体还好连接,因为片段短
...

单克隆多吗?

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6楼2018-03-01 13:11:10
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liuxiaofei

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 志者竟成 at 2018-03-01 13:11:10
单克隆多吗?
...

多啊

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7楼2018-03-01 13:12:05
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

基本不行,还是重做吧。
不过很多人有过这种rookie mistake,重做就是了,没什么大不了
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
8楼2018-03-02 05:37:05
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风逸1991

铁虫 (著名写手)

但行好事莫问前程
9楼2020-07-25 19:24:05
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