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aeolian1985

木虫 (小有名气)

[交流] [交流求助]【实验技术】关于测定蛋白构象的问题

我的蛋白是E.coli体系表达的,表达量比较低,需要测定蛋白构象,但是由于蛋白透析液的盐浓度过高(包含有5M NaCl溶液),无法进行圆二色光谱测定,但如果脱盐又会使蛋白不稳定~

考虑用其他方法测定蛋白构象,比如高分辨液体核磁共振,但是该法需要的蛋白浓度要比较高,大约得1mM左右,我的蛋白表达量通常都是μM级的,考虑用PEG浓缩法浓缩蛋白,但是测核磁还要用同位素标记,好像实现起来比较困难而且价格应该也很贵吧,不知道是否可行啊?如果只是扫核磁一维谱图能看出些什么结构呢?

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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

脱盐又会使蛋白不稳定?一般不会吧.是复性蛋白吗?
做结构分析拿到足量的高纯度蛋白才是正道
2楼2009-02-19 15:21:18
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