24小时热门版块排行榜    

查看: 6880  |  回复: 15

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[交流] DAPI是否只有染色细胞核以后才能发出蓝色荧光 已有5人参与

本人最近尝试着提取闭壳肌组织的细胞核,然后用乙醇固定,接着用DAPI染色,然后进行洗涤,最后在荧光显微镜下观察。观察的时候发现,视野里面有少许蓝绿色的片状荧光出现,开始认为是因为细胞核被DAPI染色了,但后来想想,有没有可能是一些残留的DAPI,虽然没有染色细胞核,但依然能够发出蓝绿色荧光?DAPI没有染色细胞核的话,是否在有些条件下也能产生蓝绿色荧光?
回复此楼
嘻嘻哈哈
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+5 2017-10-17 15:31:23
DAPI有荧光的,染色之后,核富集了染料,所以特别亮。其他地方的dapi如果稍微多一点,也会有颜色的
6楼2017-10-17 13:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

姐妹染色体

金虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没洗干净的残余DAPI会发光,有时候确实不一定是染料,你描述的感觉是没染上
12楼2018-02-08 09:25:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Suph

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+5 2017-10-16 21:50:50
附着在杂质的话也会有荧光

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-10-16 13:53:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zmsandwich

铁虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+10 2018-01-11 00:10:32
引用回帖:
4楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2017-10-16 21:53:12
有没有一种能够排除杂质干扰的染料呢,对细胞核的特异性很强,不会被杂质干扰?...

目前常用的染核的就是DAPI和SYBR GREEN I 了,都用过,感觉差异不大,另,我们用的是3%的甲醛固定的,如果时间充足,可以尝试一下。
11楼2017-11-06 19:40:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落雪6

铁杆木虫 (正式写手)

小兵

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+5 2017-10-17 15:30:22
除了结合到细胞核上的DAPI外,也可以检测到蓝色荧光!

发自小木虫Android客户端
3楼2017-10-16 14:20:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Suph at 2017-10-16 13:53:50
附着在杂质的话也会有荧光

有没有一种能够排除杂质干扰的染料呢,对细胞核的特异性很强,不会被杂质干扰?
嘻嘻哈哈
4楼2017-10-16 21:53:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Suph

银虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+5 2017-10-17 15:30:42
我觉得杂质毕竟是少数,如果荧光特别多特别亮的话,应该是你要的东西,不管用什么样的燃料,杂质肯定会有,但不会太多

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-10-17 00:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ronk001

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
染核之后洗一下嘛,把背景洗掉
13楼2018-02-27 09:09:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Suph at 2017-10-17 00:18:21
我觉得杂质毕竟是少数,如果荧光特别多特别亮的话,应该是你要的东西,不管用什么样的燃料,杂质肯定会有,但不会太多

上面提到的杂质指的是染料里面本身所带的杂质,还是细胞里面或者胞外的杂质?
嘻嘻哈哈
7楼2017-10-17 15:33:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Suph

银虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2017-10-17 15:33:48
上面提到的杂质指的是染料里面本身所带的杂质,还是细胞里面或者胞外的杂质?...

都有可能吧

发自小木虫IOS客户端
8楼2017-10-17 15:36:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hsuvy

新虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+5 2017-10-24 13:08:41
我有用高分子来接着细胞 发现高分子也会被dapi给染色

发自小木虫IOS客户端
9楼2017-10-24 08:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xipha

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
wuhao4850103: 金币+5 2017-11-04 14:17:55
DAPI 染的是核酸,不仅仅是细胞核才有。
10楼2017-10-31 00:23:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wuhao4850103 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 16/800 2026-08-14 16:02 by 启萌科技
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +4 Ldrop2023 2026-08-13 4/200 2026-08-14 14:50 by Tide man
[基金申请] filecode +5 cratir 2026-08-14 9/450 2026-08-14 12:25 by 医学老男孩
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
信息提示
请填处理意见