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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » DAPI是否只有染色细胞核以后才能发出蓝色荧光
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)

[交流] DAPI是否只有染色细胞核以后才能发出蓝色荧光 已有5人参与

本人最近尝试着提取闭壳肌组织的细胞核，然后用乙醇固定，接着用DAPI染色，然后进行洗涤，最后在荧光显微镜下观察。观察的时候发现，视野里面有少许蓝绿色的片状荧光出现，开始认为是因为细胞核被DAPI染色了，但后来想想，有没有可能是一些残留的DAPI，虽然没有染色细胞核，但依然能够发出蓝绿色荧光？DAPI没有染色细胞核的话，是否在有些条件下也能产生蓝绿色荧光？
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嘻嘻哈哈
1楼 2017-10-16 12:59:54
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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wuhao4850103: 金币+5 2017-10-17 15:31:23
DAPI有荧光的，染色之后，核富集了染料，所以特别亮。其他地方的dapi如果稍微多一点，也会有颜色的
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6楼2017-10-17 13:30:27
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姐妹染色体

金虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没洗干净的残余DAPI会发光，有时候确实不一定是染料，你描述的感觉是没染上
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12楼2018-02-08 09:25:37
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Suph

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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wuhao4850103: 金币+5 2017-10-16 21:50:50
附着在杂质的话也会有荧光

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2楼2017-10-16 13:53:50
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zmsandwich

铁虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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wuhao4850103: 金币+10 2018-01-11 00:10:32
引用回帖:
4楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2017-10-16 21:53:12
有没有一种能够排除杂质干扰的染料呢，对细胞核的特异性很强，不会被杂质干扰？...

目前常用的染核的就是DAPI和SYBR GREEN I 了，都用过，感觉差异不大，另，我们用的是3%的甲醛固定的，如果时间充足，可以尝试一下。
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11楼2017-11-06 19:40:37
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落雪6

铁杆木虫 (正式写手)

小兵
★ ★ ★ ★ ★ ★
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wuhao4850103: 金币+5 2017-10-17 15:30:22
除了结合到细胞核上的DAPI外，也可以检测到蓝色荧光！

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3楼2017-10-16 14:20:43
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wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Suph at 2017-10-16 13:53:50
附着在杂质的话也会有荧光

有没有一种能够排除杂质干扰的染料呢，对细胞核的特异性很强，不会被杂质干扰？
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4楼2017-10-16 21:53:12
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Suph

银虫 (正式写手)
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wuhao4850103: 金币+5 2017-10-17 15:30:42
我觉得杂质毕竟是少数，如果荧光特别多特别亮的话，应该是你要的东西，不管用什么样的燃料，杂质肯定会有，但不会太多

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5楼2017-10-17 00:18:21
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ronk001

新虫 (小有名气)
★
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染核之后洗一下嘛，把背景洗掉
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13楼2018-02-27 09:09:28
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普通回帖

wuhao4850103

银虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Suph at 2017-10-17 00:18:21
我觉得杂质毕竟是少数，如果荧光特别多特别亮的话，应该是你要的东西，不管用什么样的燃料，杂质肯定会有，但不会太多

上面提到的杂质指的是染料里面本身所带的杂质，还是细胞里面或者胞外的杂质？
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7楼2017-10-17 15:33:48
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Suph

银虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wuhao4850103 at 2017-10-17 15:33:48
上面提到的杂质指的是染料里面本身所带的杂质，还是细胞里面或者胞外的杂质？...

都有可能吧

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8楼2017-10-17 15:36:44
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hsuvy

新虫 (小有名气)
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wuhao4850103: 金币+5 2017-10-24 13:08:41
我有用高分子来接着细胞 发现高分子也会被dapi给染色

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9楼2017-10-24 08:48:54
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xipha

木虫 (正式写手)
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wuhao4850103: 金币+5 2017-11-04 14:17:55
DAPI 染的是核酸，不仅仅是细胞核才有。
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10楼2017-10-31 00:23:30
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