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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 用新的试剂盒，RNA老是降解
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)

[求助] 用新的试剂盒，RNA老是降解已有1人参与

各位大神，
       之前一直用的RNA提取试剂盒用完了，买了一盒新的试剂盒，跟之前的是一样的，结果提出来的RNA的OD260/230只有零点几，RNA的OD260/280达到了3点多，RNA浓度为60-70ng/ul，跑胶显示RNA降解了（只有最下面那一团亮光），我的样品和之前的一样，换了别的样品也是这种情况，所以应该不是样品的问题，可是之前买的这种试剂盒效果很好啊，不知道为什么会使这种情况，各位大神有什么建议吗，另外，假如，既不是样品的问题，也不是试剂盒的问题，那还有哪些问题呢
       帮帮我吧，快一个月了，实验没进展，快抑郁了
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1楼2017-10-14 21:07:19
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
另外，我用了一个别的试剂盒，该试剂盒应该和之前的试剂盒，试剂以及步骤基本是一致的，提出来的RNA的260/280为2.1-2.2，260/230仍然是零点几，浓度也比较低，跑胶仍然是降解，，，我不知道这到底是发生了什么，各位大神，指导指导我吧
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2楼2017-10-14 21:50:24
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2017-10-15 10:05:13
你应该做一下对照，试剂盒应该有提供吧，检查一下你的操作和系统。甚至可以直接用提好的rna试试系统。

用提好的rna试试系统

大神，这句话是什么意思啊
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4楼2017-10-15 10:48:36
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2017-10-15 10:05:13
你应该做一下对照，试剂盒应该有提供吧，检查一下你的操作和系统。甚至可以直接用提好的rna试试系统。

而且，试剂盒里没有对着啊，你说的是ddH2O吗
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5楼2017-10-15 10:49:32
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2017-10-15 11:42:05
用提好的rna直接跑胶看看跑胶过程有没有问题，过一遍试剂盒看看试剂盒有么有问题。

过一遍试剂盒看看试剂盒有么有问题

我用什么过一遍试剂盒呢，，直接用DDH20吗，不用实验材料了?
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7楼2017-10-15 12:14:45
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hzau103 at 2017-10-15 22:16:06
他的意思是把RNA当样本再提一遍。
...

可是我不懂，既然260/280>2.2，说明RNA已经降解了，既然降解了，那么我再重新把它提一遍，那不是提不出来了麻，，为什么还要这样做呢
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10楼2017-10-15 23:26:18
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