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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 脯氨酸测量实验中，甲苯层颜色没有什么变化，光度值好低，实验组与处理组间没有差
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luoriyuhui94

铁虫 (初入文坛)

[求助] 脯氨酸测量实验中，甲苯层颜色没有什么变化，光度值好低，实验组与处理组间没有差

我是测量干旱处理水稻中脯氨酸变化，按照文献中的步骤，叶子用磺基水杨酸研磨，沸水浴10分钟提取，离心取上清，加冰醋酸和酸性茚三酮，沸水浴1小时，冷却后，加入甲苯震荡萃取，但分层后甲苯没有什么颜色，颜色集中在下层。测量520nm下的光度值，实验组与处理组没有差别，数值在0.06左右。请问有人知道是什么出问题了吗，实验重复了4次都是这个结果，测标准曲线可以测出，就是样品中测不出来。。。
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1楼 2017-10-12 15:06:21
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910903

新虫 (小有名气)
配的是酸性茚三酮吗？是用磷酸和乙酸溶的吗？如果是的话没错啊，我跟你步骤差不多，我提的是盐胁迫下的，可以提出来呀。

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4楼2017-10-21 02:15:31
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当代农民

新虫 (著名写手)
建议用震动仪震动试管，这样萃取效果好，用手摇晃效果差

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2楼2017-10-12 21:03:00
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luoriyuhui94

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 当代农民 at 2017-10-12 21:03:00
建议用震动仪震动试管，这样萃取效果好，用手摇晃效果差

谢谢解答，我是将体系缩小了，400微升提取液加入2ml EP管中，再加400微升的冰醋酸和茚三酮，最后加入800微升的甲苯，涡旋了好久，但还是没见上层颜色变深
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3楼2017-10-12 21:45:55
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luoriyuhui94

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 910903 at 2017-10-21 02:15:31
配的是酸性茚三酮吗？是用磷酸和乙酸溶的吗？如果是的话没错啊，我跟你步骤差不多，我提的是盐胁迫下的，可以提出来呀。

是的是的，我重复好几次了，测得值就在0.06左右，干旱与对照都没有区别，只能先做其他实验了，我都怀疑是不是我磨样时用了石英砂，或是试剂的问题，这几天再重做试试。
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5楼2017-10-26 21:46:37
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