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冯雪枫

新虫 (小有名气)

[交流] 反转录 已有2人参与

刚做反转录，用反转录产物cDNA电泳，理论上来说应该有一条模糊的条带，可是我这是怎么回事呢？求指！导，求指导，求指导！

反转录


反转录-1


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1楼 2017-10-11 22:59:21
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绿色心情cc

铜虫 (小有名气)
★
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反转录产物cDNA电泳有什么意义吗？理论上有模糊的条带吗，我从没听说过。。

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2楼2017-10-12 04:46:21
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冯雪枫

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 绿色心情cc at 2017-10-12 04:46:21
反转录产物cDNA电泳有什么意义吗？理论上有模糊的条带吗，我从没听说过。。

有的，类似于RNA降解的条带，做定量结果不好，就想看看是不是反转录没转好

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3楼2017-10-12 11:01:26
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绿色心情cc

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冯雪枫 at 2017-10-12 11:01:26
有的，类似于RNA降解的条带，做定量结果不好，就想看看是不是反转录没转好
...

我建议用内参引物扩增一下比较好。

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4楼2017-10-12 13:48:22
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冯雪枫

新虫 (小有名气)
哦，内参引物是我直接从人家的文献中找的，那我如何确定它的长度呢

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5楼2017-10-12 14:57:26
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bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
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我认为用这个办法判断反转录是否成功不靠谱， 反转录的产物是单链的DNA， 再加上系统里本来有的RNA， 天知道跑电泳会出现什么结果。
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6楼2017-10-12 18:36:12
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