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浮云苍狗

新虫 (初入文坛)

[交流] 请问一下,有没有大神做过用BODIPY 493/503染色细胞内的脂滴的? 已有3人参与

我是用DMSO溶解成1 mg/ml,然后用PBS稀释1000倍,L02细胞固定后室温染色30 min,在荧光显微镜下能看到非常清晰的绿色荧光,但是遇到了几个问题:

1、淬灭很快,30 s左右就暗得几乎看不见了,加了抗淬灭剂也没用。网上搜索好像没人遇到过这个问题。

2、如何通过荧光判断脂质多少?在曝光时间等等条件都相同的情况下,是看脂滴的多少、脂质层的厚度判断,还是看荧光的亮度?我遇到过给药后脂滴变少,但是亮度变得很强,该怎么比较?

有没有大神做过的,能帮忙解决一下?万分感谢
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Kooony

新虫 (小有名气)

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刚刚染色观察完,遇到同样的问题,就是淬灭特别快,想请教楼主后面是怎么解决这个问题的
2楼2020-08-06 14:56:15
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lks110

新虫 (小有名气)

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没有做不成的,只有不努力的。
3楼2022-01-04 11:47:27
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陌小儿

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:
2楼: Originally posted by Kooony at 2020-08-06 14:56:15
刚刚染色观察完,遇到同样的问题,就是淬灭特别快,想请教楼主后面是怎么解决这个问题的

请问解决了吗?最近我也是,请问您怎么解决的?
4楼2022-04-07 11:13:40
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