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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助细胞破碎问题
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yqxhjld

[交流] 求助细胞破碎问题

我有一株戴尔福特菌属的菌，细胞培养压榨后，得到的破碎液非常的粘稠，根本不能够离心，且所想要的酶好像就在那种粘稠的物质中，我用什么才能使细胞破碎液不粘稠。

[ Last edited by yqxhjld on 2009-2-18 at 11:57 ]
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1楼 2009-02-18 11:55:32
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zhhl2981

木虫 (职业作家)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
可以将培养液稀释
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2楼2009-02-18 14:43:19
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zzq1983417

银虫 (小有名气)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
你可以用其它方法破碎一下细菌，比如说温差破碎法，超声波破碎，看看是不是还一样粘稠啊。
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3楼2009-02-18 17:16:56
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jqq1985

银虫 (正式写手)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
加入1mM的EDTA 螯合其中的重金属离子，情况可能会好点
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4楼2009-02-18 18:32:36
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pidou213

木虫 (正式写手)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
加入Tris-EDTA缓冲液吧，那样稀释一下，然后离心，相信可以的到你想要的结果的
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见得多爱的多
5楼2009-02-18 20:55:22
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HDLWH

木虫 (正式写手)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
用tris-hc稀释后在离心，也可试试层析和分子筛的办法
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6楼2009-02-19 08:16:11
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qwj_1001

木虫 (著名写手)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
我建议你使用超声波破碎
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我们来自五湖四海为了一个目标聚集在这里，使我们获得知识。
7楼2009-02-19 08:20:39
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
如果破碎后很粘稠的化，可以加一点絮凝剂的，让细胞壁沉淀下来，最常见的絮凝剂是硅藻土。
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七窍通了六窍
8楼2009-02-19 08:30:49
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humants

金虫 (正式写手)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by qwj_1001 at 2009-2-19 08:20:
我建议你使用超声波破碎

支持，细胞破碎后便粘稠是因为胞内的基因组核酸释放，可以加核酸酶将其破坏，但是不如超声方法经济。
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9楼2009-02-19 08:44:00
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wlyu1228

新虫 (小有名气)
★
yqxhjld(金币+1):谢谢参与
我有一株菌也是这样。有的菌就是挺难破壁的，也有可能你的酶是膜结合酶，这样是很难和细胞碎片分开的。可以试试加1%吐温-20抽提一下，然后离心看看上清有无效果。
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10楼2009-03-05 21:47:47
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