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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » pMG36e质粒提不出来!
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金色海豚

金虫 (小有名气)

[交流] pMG36e质粒提不出来!

我将pMG36e空载体转化入大肠杆菌DH5a中提取质粒。红霉素一直不溶于无水乙醇，查了资料后我就加了一点稀盐酸进去，溶解后加入了培养基中，长菌后进行质粒提取，但是一直提不出来，条带在100bp以下实在是不知道原因。。提了好几次了，还望各位大神不吝赐教～～

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1楼 2017-10-07 14:35:35
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gengxin60
祝福
2楼2017-10-08 15:26:17
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
质粒没有那么小吧

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你好
3楼2017-10-09 12:44:20
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-10-11 07:43:46
100bp以下是有rna污染吗，最好用试剂盒试试，如果不行就可能是转化或者抗生素问题

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你好
4楼2017-10-09 12:45:22
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金色海豚

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 1006641214 at 2017-10-09 12:45:22
100bp以下是有rna污染吗，最好用试剂盒试试，如果不行就可能是转化或者抗生素问题

谢谢您的回复，我用的是天根的质粒小提，您这样说的话，应该是抗生素的问题吧。我再试试。

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5楼2017-10-09 14:44:40
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1006641214

木虫 (正式写手)

wublab
引用回帖:
5楼: Originally posted by 金色海豚 at 2017-10-09 14:44:40
谢谢您的回复，我用的是天根的质粒小提，您这样说的话，应该是抗生素的问题吧。我再试试。
...

有加RNase吧

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你好
6楼2017-10-09 23:12:04
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金色海豚

金虫 (小有名气)
内容已删除
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7楼2017-10-10 23:07:11
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莎莎V淘淘

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你是要用这个载体与目的片段连接吗？

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8楼2017-10-18 10:42:34
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zlon

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 金色海豚 at 2017-10-10 23:07:11
加了的今天又试着提了一下，这次没有在100bp以下，然而却在4500bp以上，可我的目的条带也只有3200bp而已。。。好纳闷儿。。找不到原因
...

现在提的怎么样？我现在也在做，也是提不出来
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9楼2017-10-29 16:13:23
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810763156

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好 你现在提出来了吗  我现在也提不出来  提出来了  求帮忙  急
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10楼2018-04-24 19:36:32
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