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新虫 (初入文坛)

[交流] 如何切除GST加17KDa的小分子蛋白

我的目的蛋白是17KDa，现在是和GST标签连在一起，想切除GST标签，只要自己目的蛋白，请问有人知道问做吗？

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1楼 2017-10-06 21:14:18

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新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

1楼: Originally posted by 南坊小站 at 2017-10-06 21:14:18
我的目的蛋白是17KDa，现在是和GST标签连在一起，想切除GST标签，只要自己目的蛋白，请问有人知道问做吗？

我也需要解决这个问题，楼主现在摸索出方法了吗？

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2楼2018-01-12 11:45:54

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金虫 (小有名气)

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看序列，在标签和目的蛋白之间有什么蛋白酶切位点，就用相应的蛋白酶去酶切（印象中好像就ULP1、Xa和肠激酶能切干净，其它酶切完会有残留氨基酸），如果没有酶切位点，那么就是构建问题了，只能重新设计了

3楼2018-01-12 20:59:06

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荣誉版主 (正式写手)

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用reduced glutathione。蛋白提纯最普遍的方法之一。建议看一下分子克隆
附加知识普及：https://www.thermofisher.com/us/ ... tion.html#gstfusion

Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner

4楼2018-01-13 12:44:40

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