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南坊小站

新虫 (初入文坛)

[交流] 如何切除GST加17KDa的小分子蛋白

我的目的蛋白是17KDa,现在是和GST标签连在一起,想切除GST标签,只要自己目的蛋白,请问有人知道问做吗?

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杜杜鸟2011

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
1楼: Originally posted by 南坊小站 at 2017-10-06 21:14:18
我的目的蛋白是17KDa,现在是和GST标签连在一起,想切除GST标签,只要自己目的蛋白,请问有人知道问做吗?

我也需要解决这个问题,楼主现在摸索出方法了吗?

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2楼2018-01-12 11:45:54
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zsygxh

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看序列,在标签和目的蛋白之间有什么蛋白酶切位点,就用相应的蛋白酶去酶切(印象中好像就ULP1、Xa和肠激酶能切干净,其它酶切完会有残留氨基酸),如果没有酶切位点,那么就是构建问题了,只能重新设计了
3楼2018-01-12 20:59:06
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用reduced glutathione。 蛋白提纯最普遍的方法之一。建议看一下分子克隆
附加知识普及:https://www.thermofisher.com/us/ ... tion.html#gstfusion
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
4楼2018-01-13 12:44:40
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