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求构载体高手 赐教亚细胞定位载体构建问题
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| 本人最近在构建亚细胞定位表达载体(植物),使用的载体是被实验室前人改造过的pCHF3,插入了mGFP5-ER,但MCS被严重破坏,(仅剩的序列:CTAGAGGATCCAAGGAGATATAACA,只有一个酶切位点BamH I 了),切酶切位点BamH I 与GFP之间的碱基数为14个,非三的倍数,现我想在35S与GFP之间插入我的目的片段(酶切位点使用BamH I),需要在目的片段后面插入一些碱基使目的片段与GFP之间的碱基数变为三倍倍数吗?若需要则对插入碱基后形成的新的几个氨基酸有什么要求(极性?电荷?) |
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