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haiyan123

木虫 (小有名气)

牛哄哄

[求助] 有关突变株制作的问题

在制作突变株。
在最后验证步骤,对导入片段(up-resistance gene-down)进行PCR扩增,电泳条带跑出两条,一个很亮的是期望的大小,还有一个比较淡的条带是在野生株出现的大小(阳性对照)。
疑问:为什么会出现这个状况?是没有敲除完全嘛?要怎样去除这个扰人的条带?
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般若
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leonscu

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
snoopytbw: 金币+3, 鼓励 2017-10-05 12:14:21
单交换,把菌株纯化一下,再筛一次就得到一条带的突变体菌株了

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lessismore.
2楼2017-10-05 09:34:11
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WRU123

新虫 (初入文坛)

可能有阳性污染,再传几代,换新稀释的引物 pcrmix 扩增

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-11-18 08:21:08
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