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用紫外分光光度法测维生素C浓度时出现问题 已有1人参与
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之前做维生素C标准曲线时用的是去离子水作为溶剂(pH=6.3),测试时用的波长是242nm,之后用缓冲溶液配(pH=7)300微克/毫升的溶液,测出的吸光度却只有0.537，用pH=5.5的溶液配，吸光度却有1.748，与之前画的标准曲线上的数值完全对不上号，请问这是为什么，是因为溶液pH改变后，其最高峰对应的波长改变，从而导致测出的吸光度发生变化吗?以后每配一种溶液，是不是都需要重新选择波长来绘制标准曲线? 发自小木虫Android客户端 |
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mobirthte
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【答案】应助回帖
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紫外分光光度计测量吸光度是需要扣除溶剂的基准的吧，选择溶剂时也应该选择与最大吸收峰波长相距较远溶剂。标准曲线最好使用相应的溶剂做标准曲线。如果想确定最大吸收峰是否发生移动建议扫一个全波长，个人认为楼主的样品应当没有发生移动。 针对出现的问题给出以下建议： 首先看看是不是操作出现问题，从头到尾认真想一遍，做一遍，如果不确定就找一个人看你做一遍，把实验用具全部按照要求清洗一遍，再测量一次如果还是这个结果，换用有数据物质的对照测量一遍，与数据匹配度比较高在误差范围内的话，就是你标准曲线需要重做了。 |
2楼2017-10-10 09:20:50
