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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问酵母跑pcr后进行跑胶检验，为啥都在点样空，跑不出来
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问酵母跑pcr后进行跑胶检验，为啥都在点样空，跑不出来 已有1人参与

请问酵母跑pcr后进行跑胶检验，为啥都在点样空，跑不出来

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1楼 2017-09-30 19:13:15
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家喻户晓

新虫 (小有名气)
酵母是真核细胞，不能用原核细胞那一套来做PCR，跑PCR你是怎么做的？

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2楼2017-09-30 19:32:02
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luckydog52

木虫 (著名写手)
菌落pcr?

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自信源于一次次成功的积累
3楼2017-09-30 19:39:15
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一叶知秋365

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模板加的太多了吧？糖或蛋白会影响电泳，跑不动就在孔里了。建议买个酵母PCR裂解酶，先把菌落裂解一下，再P。

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4楼2017-10-03 12:56:48
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by luckydog52 at 2017-09-30 19:39:15
菌落pcr?

是的

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5楼2017-10-17 10:37:31
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-10-03 12:56:48
模板加的太多了吧？糖或蛋白会影响电泳，跑不动就在孔里了。建议买个酵母PCR裂解酶，先把菌落裂解一下，再P。

模板是挑菌，用牙签

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6楼2017-10-17 10:37:56
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 家喻户晓 at 2017-09-30 19:32:02
酵母是真核细胞，不能用原核细胞那一套来做PCR，跑PCR你是怎么做的？

按20的体系，10蓝mix，8dd水，1上游引物，1下游引物，配好体系在台子里挑二缺皿上的酵母，然后放pcr仪中

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7楼2017-10-17 10:40:30
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