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贝柔儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问酵母跑pcr后进行跑胶检验,为啥都在点样空,跑不出来 已有1人参与

请问酵母跑pcr后进行跑胶检验,为啥都在点样空,跑不出来

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家喻户晓

新虫 (小有名气)

酵母是真核细胞,不能用原核细胞那一套来做PCR,跑PCR你是怎么做的?

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2楼2017-09-30 19:32:02
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luckydog52

木虫 (著名写手)

自信源于一次次成功的积累
3楼2017-09-30 19:39:15
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一叶知秋365

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
模板加的太多了吧?糖或蛋白会影响电泳,跑不动就在孔里了。建议买个酵母PCR裂解酶,先把菌落裂解一下,再P。

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4楼2017-10-03 12:56:48
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by luckydog52 at 2017-09-30 19:39:15
菌落pcr?

是的

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5楼2017-10-17 10:37:31
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 一叶知秋365 at 2017-10-03 12:56:48
模板加的太多了吧?糖或蛋白会影响电泳,跑不动就在孔里了。建议买个酵母PCR裂解酶,先把菌落裂解一下,再P。

模板是挑菌,用牙签

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6楼2017-10-17 10:37:56
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贝柔儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 家喻户晓 at 2017-09-30 19:32:02
酵母是真核细胞,不能用原核细胞那一套来做PCR,跑PCR你是怎么做的?

按20的体系,10蓝mix,8dd水,1上游引物,1下游引物,配好体系在台子里挑二缺皿上的酵母,然后放pcr仪中

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7楼2017-10-17 10:40:30
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