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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [求助]高保真的DNA polymerase怎么用？
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erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] [求助]高保真的DNA polymerase怎么用？

各路高手，我是买上海生工高保真的pfu DNA polymerase！它需要用什么来稀释吗？

2.我原本是用宝生物聚合酶连接T-载体的酶，已经克隆出我要的目的基因了，现在用其他公司的高保真聚合酶，克隆出来的目的基因片段能与以前的混合在一起吗？如果可以，还是同样用回连接T载体吗？因为上海生工的商品书没有清楚写明。

谢谢。
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1楼 2009-02-17 15:43:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
1、为何要稀释？酶液稀释了不好。
2、不明白你第二个问题想问什么。pfu扩出来的是平末端，可以用加A试剂盒自己弄一下连上T载体。
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2楼2009-02-17 15:46:53
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sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader
1.酶不需要稀释
2.需要看保真的聚合酶扩增的片段是否带A,有的带有的不带，带的话可以直接连T-载体
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会当凌绝顶，一览众山小
3楼2009-02-18 03:47:59
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
1一般不需稀释,若稀释的话用它自身的buffer
2高保真扩出来的是平末端,有能直接连到T载体上,要先加A
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4楼2009-02-18 08:22:52
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wmjiang

银虫 (小有名气)
不需要稀释
高保真扩出来的是平末端，连到用EcoRV切的pBS上就行了
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5楼2009-03-04 20:56:18
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