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yijizhang

新虫 (初入文坛)

[求助] 敲除载体构建出现了奇怪的问题

是这样的,最近在用同源重组的方法进行敲除载体的构建,p了上游和下游300个bp,并p了卡那霉素的基因,希望构成puc18-上游-kan-下游这样一个敲除质粒。质粒构建完后我单独p了下kan、上游、下游,都显示有条带,但是我用引物p整段的上游-kan-下游片段的时候却没有条带了!求问这是为什么?

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