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2,4-二硝基氯苯做氨基酸的柱前衍生遇到的一些问题
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目前本人在做一个培养基中氨基亚砜蛋氨酸（MSX）的检测，考虑到氨基酸类在液相中吸收弱，想到了柱前衍生，查了一些资料用了2,4-二硝基氯苯（CDNB）。 实验条件：1mL 1 mg/mL 的MSX+1 mL Na2CO3 (pH=9.0, 1%)+227 uL 30mg/mL CDNB，85℃暗处反应1h，冷却+0.5 mL 0.1mol/L HCl, 加水定容至10mL，UPLC进样。 色谱条件： 色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Peptide BEH C18 吸收波长：360 nm， 流动相：70% NaAC-HAC, 30% ACN 流速：0.2 mL/min 现在出现的问题是：20 min内出的较为明显的峰是CDNB的峰，没有经CDNB衍生后的新的峰出现 我想请教做过类似柱前衍生实验的前辈，是我这个衍生过程有哪里不完善吗？还是色谱条件不对？但这种方法已经很成熟了，文献报道也很多了。还是这个氨基亚砜蛋氨酸不容易被衍生化？ |
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