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新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量中同一引物,不同模板为什么会有不同的峰数 已有2人参与

在实时荧光定量实验中,检测目标物质含量的多少,同一对引物,结果不同,A模板是单峰,B模板是双峰,自己猜测是由于目标物质含量的多少导致的,初步结果是目标含量少的是双峰,含量多的是单峰,各位大神,这是为什么呢
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
片段长的是双峰吧,可能降解
2楼2017-09-27 12:31:11
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1241977932

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-09-27 12:31:11
片段长的是双峰吧,可能降解

大小也是一样的

发自小木虫Android客户端
3楼2017-09-30 18:48:45
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-10-01 09:48:10
1、模板是不确定的,只有第一轮PCR反应的模板是原始模板,从第二次PCR反应开始,上一轮PCR扩增出的新DNA可以作为模板进行PCR反应。

2、PCR反应的量是指数扩增,多少轮反应就是模板的多少次方的关系,原来模板不同,对后续的反应的影响是原来模板间的差异,即原来模板差异为2倍,则最终产物也相差2倍,而这个倍数对整体扩增的30几次方的数量来比,可以忽略不计了,也就是无法区分开。
及时行乐,人生不留遗憾!
4楼2017-09-30 20:00:19
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