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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 实时荧光定量中同一引物，不同模板为什么会有不同的峰数
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1241977932

新虫 (初入文坛)

[求助] 实时荧光定量中同一引物，不同模板为什么会有不同的峰数 已有2人参与

在实时荧光定量实验中，检测目标物质含量的多少，同一对引物，结果不同，A模板是单峰，B模板是双峰，自己猜测是由于目标物质含量的多少导致的，初步结果是目标含量少的是双峰，含量多的是单峰，各位大神，这是为什么呢
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1楼 2017-09-27 11:27:57
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
片段长的是双峰吧，可能降解
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2楼2017-09-27 12:31:11
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1241977932

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-09-27 12:31:11
片段长的是双峰吧，可能降解

大小也是一样的

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3楼2017-09-30 18:48:45
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晋鹏

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2017-10-01 09:48:10
1、模板是不确定的，只有第一轮PCR反应的模板是原始模板，从第二次PCR反应开始，上一轮PCR扩增出的新DNA可以作为模板进行PCR反应。

2、PCR反应的量是指数扩增，多少轮反应就是模板的多少次方的关系，原来模板不同，对后续的反应的影响是原来模板间的差异，即原来模板差异为2倍，则最终产物也相差2倍，而这个倍数对整体扩增的30几次方的数量来比，可以忽略不计了，也就是无法区分开。
赞一下 回复此楼
及时行乐，人生不留遗憾！
4楼2017-09-30 20:00:19
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