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lenaimiao

金虫 (正式写手)


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熔解曲线问题
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最近做qPCR,NTC没有出现扩增曲线,但熔解曲线确有杂峰,这是什么情况?请教各位大神了。

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木虫 (职业作家)



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溶解曲线有杂峰说明引物特异性不好

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11楼2017-09-27 11:04:54
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1298067895

木虫 (职业作家)


根据你的描述可以考虑换新的引物来做

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12楼2017-09-27 11:06:03
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lenaimiao

金虫 (正式写手)


引用回帖:
11楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-09-27 11:04:54
溶解曲线有杂峰说明引物特异性不好

跑胶是单条带,用SYBR green做的时候熔解曲线单峰,就是换成evagreen 后出现杂峰了,引物应该没问题

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24楼2017-09-27 11:43:41
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lenaimiao

金虫 (正式写手)


引用回帖:
12楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-09-27 11:06:03
根据你的描述可以考虑换新的引物来做

如果是引物问题,错配或者dimer ,那NTC应该也会有扩增曲线吧,用的是双链结合染料啊,已经BLAST过,跑过胶了,正常啊

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25楼2017-09-27 11:47:00
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pandongzi2楼
2017-09-27 11:01   回复  
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wlh9664楼
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4182362858楼
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129806789510楼
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Allanzj13楼
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nageshui14楼
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阿同木15楼
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fbbqt16楼
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蛋蛋153317楼
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yanqicao18楼
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139307561519楼
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ygsu21楼
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ggfguide22楼
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54061623623楼
2017-09-27 11:22   回复  
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