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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 熔解曲线问题
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lenaimiao

金虫 (正式写手)
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熔解曲线问题
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最近做qPCR，NTC没有出现扩增曲线，但熔解曲线确有杂峰，这是什么情况？请教各位大神了。

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1楼 2017-09-27 11:01:20
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1298067895

木虫 (职业作家)
★
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溶解曲线有杂峰说明引物特异性不好

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11楼2017-09-27 11:04:54
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1298067895

木虫 (职业作家)
根据你的描述可以考虑换新的引物来做

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12楼2017-09-27 11:06:03
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lenaimiao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-09-27 11:04:54
溶解曲线有杂峰说明引物特异性不好

跑胶是单条带，用SYBR green做的时候熔解曲线单峰，就是换成evagreen 后出现杂峰了，引物应该没问题

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24楼2017-09-27 11:43:41
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lenaimiao

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 1298067895 at 2017-09-27 11:06:03
根据你的描述可以考虑换新的引物来做

如果是引物问题，错配或者dimer ，那NTC应该也会有扩增曲线吧，用的是双链结合染料啊，已经BLAST过，跑过胶了，正常啊

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25楼2017-09-27 11:47:00
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pandongzi2楼
2017-09-27 11:01   回复  
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wajj198741343楼
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wlh9664楼
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sxd5832969325楼
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万邦翻译6楼
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旋雪旋雪7楼
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4182362858楼
2017-09-27 11:03   回复  
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江东闲人9楼
2017-09-27 11:03   回复  
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129806789510楼
2017-09-27 11:04   回复  
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Allanzj13楼
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nageshui14楼
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阿同木15楼
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fbbqt16楼
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蛋蛋153317楼
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yanqicao18楼
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139307561519楼
2017-09-27 11:18   回复  
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xiaoxia702820楼
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ygsu21楼
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ggfguide22楼
2017-09-27 11:21   回复  
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54061623623楼
2017-09-27 11:22   回复  
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