【答案】应助回帖

11楼2017-09-26 19:39:42

静静的泪滴

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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感觉非常像引物二聚体，目的条带也不是很亮，应该是引物设计的不是很到位！

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12楼2017-09-28 14:12:00

mfl梅凤玲

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【答案】应助回帖

下面的带应该不是引物二聚体，应该是引物的特异性不好，试着调一下退火温度看看，这对荧光定量PCR应该会有影响

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13楼2017-09-29 08:59:02

山里的猫先森

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跑普通PCR看看特异性？？

14楼2017-10-22 21:29:57

draco1987

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【答案】应助回帖

别白费力气了，这引物多半是废了，重新设计合成吧！

15楼2017-11-22 16:52:30

ZYY张媛媛

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实时荧光定量PCR仪器有自带的熔解曲线程序

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16楼2017-12-14 15:32:44

分子白痴

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【答案】应助回帖

感觉是引物二聚体，可以先跑个普通梯度PCR，找到合适的温度，再荧光定量

17楼2017-12-20 09:34:46

csp3553

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【答案】应助回帖

1.照片不太清楚，如果可以，放清楚照片，我们在帮忙判断；
2.各位同行都已说了，有两种可能，
一种是引物二聚体，所以形成了很多小于100bp的条带，此时你只能是重新设计引物；
二是引物专一性不够，但是我本人设计引物专一性不够的话，会跑出好几条条带，不过都是比较靠上的为止。
此时的解决方法是，要么你在用你的cDNA试一下多个退火温度下PCR产物情况，看是不是还是如此；要么，你重新设计下
引物，再来试下不同退火温度下的情况。

第一次答疑，可能说的不好，多包涵，谢谢！

18楼2018-01-23 09:50:25

liuxinchao

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引物二聚体

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19楼2018-01-23 15:37:15