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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何分离相差40bp的DNA片段
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周燕霞

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何分离相差40bp的DNA片段

我想回收目的片段做链接，但是目的片段与载体相差只有40bp,用琼脂糖凝胶电泳如何分开？

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1楼 2017-09-24 00:05:32
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luckydog52

木虫 (著名写手)
你从载体上切片段，连到另一个载体？

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自信源于一次次成功的积累
2楼2017-09-24 03:54:57
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
毛细管点泳ABI3731

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3楼2017-09-24 08:50:19
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周燕霞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luckydog52 at 2017-09-24 03:54:57
你从载体上切片段，连到另一个载体？

是的，请问你有办法分离吗？

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4楼2017-09-24 08:51:16
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周燕霞

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopytbw at 2017-09-24 08:50:19
毛细管点泳ABI3731

毛细管电泳是怎么做的？完了要怎么胶回？

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5楼2017-09-24 08:52:12
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)
更正，ABI3170

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6楼2017-09-24 15:15:03
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luckydog52

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 周燕霞 at 2017-09-24 08:51:16
是的，请问你有办法分离吗？
...

我一般是从一个载体pcr扩出来目的片段，回收，再切载体和片段 链接。
你这么做浓度太低了

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自信源于一次次成功的积累
7楼2017-09-24 23:32:50
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xmu_qpg

铜虫 (初入文坛)
两个策略，第一，找一个载体上的酶，把载体切散，就是你做的双酶切体系变成三酶切！第二，设计引物直接从载体上pcr你的片段

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8楼2017-09-25 06:19:57
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