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yannisJpj

新虫 (初入文坛)

[交流] Evans blue求助

evans blue标曲求助1.标准曲线制作后得不到标曲?我设置的标准曲线浓度分别是800,400,200,100,50,25,12.5 ng/ml,
方法:2mL saline (0.9%) +10?L 2%Evans Blue =100 ng/?L,取8ul(100ng/ul)+1mlsaline=800ng/ml,然后倍比稀释梯度。可是得到颜色很淡,几乎和pbs没有区别,上机测吸光度值梯度浓度相互之间也没有规律,几乎都很接近,得不到标准曲线,用不了。
?2. 脑组织取样过程:evans blue尾静脉3h后pbs灌注取材--取出血半球称湿重--1mlpbs研磨, centrifuged at 15 000g for 30 minutes—0.7 mL of the resultant supernatant was?added to an equal volume of trichloroacetic acid—24h过夜孵育后centrifugation at 15 000g for 30 minutes at 4°C,取100ul上清测吸光度(615nm). ?

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