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baby7158

金虫 (初入文坛)

[交流] 大师们赐教液相低压梯度的适应范围

各位老师,本人想知道HPLC
低压梯度的适应范围,最好也把高压梯度也说一下,重谢呵呵
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chgli1981

铁杆木虫 (著名写手)

你问得是什么意思啊
2楼2009-02-16 13:18:36
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baby7158

金虫 (初入文坛)

就是在怎样的情况下用低压梯度洗脱,
低压梯度洗脱所能带来的好处是什么/
3楼2009-02-16 18:35:30
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zhangsibao

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★
jsys(金币+3,VIP+0):感谢应助! 2-17 10:38
高压梯度
        利用两台高压泵将流动相的不同组分送入色谱柱的技术。
低压梯度
        在常压下将流动相的各组分混合,然后用高压泵将混合流动相送入色谱柱的技术。
高压梯度相对低压梯度来说属于成本高,但是死体积小。
①要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。
②梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止混合时产生气泡。
③混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。
④每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理,使其恢复到初始状态。需让10~30倍柱容积的初始流动相流经色谱柱,使固定相与初始流动相达到完全平衡。
4楼2009-02-17 09:26:41
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