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Tech_Tsingke

新虫 (初入文坛)
你是用的你的特异性的引物做的连接液扩增还是用的通用引物做的扩增？

如果是特异性的引物做的扩增，可能没有连上，你扩增的是你连接加入的模板的扩增结果。问题在连接

如果是通用引物扩增的，大小还可你的大小对的上。那么你需要核实第二次扩增的时候是用的引物：
1：是基因的特异性引物，扩增失败，那么张的是杂菌，排查平板的问题，是不是长了很久了，是不是抗生素浓度太低。
2：如果是通用引物扩增的，那么可能是pcr mix不耐脏。你师姐能做出来不代表你能做出来。可以做以下尝试，将菌落加入10ul无菌水中震荡混匀，再取1ul模板PCR扩增，能解决PCR扩增的问题。

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我追求的是目标，不是困难，so, go away! By Tsingke
11楼2017-09-20 10:26:38
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