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goujingyi123

新虫 (初入文坛)

[交流] GFP标记菌株 已有2人参与

各位大神，大家好。最近打算做给菌/根瘤菌加GFP标签的实验，刚接触，感觉啥也不懂。要做这个，需要什么质粒？到哪里能买到带GFP的质粒？有没有做过的，这个好做吗，标记成功的几率大不？求各位大神指点迷津，谢谢

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1楼 2017-09-19 13:13:27
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cuijiaqi_92

铜虫 (小有名气)
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什么质粒应该都可以吧，把GFP构建到质粒上。然后转化到菌里。
在之后用酶标仪或者荧光显微镜或者流式细胞仪 去测绿色荧光。
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山阴路的夏天
2楼2017-09-20 08:56:32
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goujingyi123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cuijiaqi_92 at 2017-09-20 08:56:32
什么质粒应该都可以吧，把GFP构建到质粒上。然后转化到菌里。
在之后用酶标仪或者荧光显微镜或者流式细胞仪 去测绿色荧光。

那比如芽孢杆菌和根瘤菌可以用同样的质粒吗，质粒从哪里买呢，能不能再给我讲讲，谢谢啦

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3楼2017-09-20 10:49:41
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biosci

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质粒很多地方都有的

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4楼2017-09-20 19:58:48
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cuijiaqi_92

铜虫 (小有名气)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by goujingyi123 at 2017-09-20 10:49:41
那比如芽孢杆菌和根瘤菌可以用同样的质粒吗，质粒从哪里买呢，能不能再给我讲讲，谢谢啦
...

既然是细菌，你就做转化试一试了。
质粒的话，是自己构建的，把GFP和载体用同样的酶双酶切，然后在连起来。
祝好运！
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山阴路的夏天
5楼2017-09-21 09:23:37
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