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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 存档旧帖 » 分子克隆，片段分段扩增，求助
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第四氪星球

新虫 (初入文坛)

[交流] 分子克隆，片段分段扩增，求助 已有2人参与

现在想在拟南芥上克隆一段3K的片段，由于片段太长，导师建议分段扩增，片段中间选一个单一的酶切位点，设计引物跨酶切位点，现在两个片段都已经扩出来了，并且连到T载体上测序正确，酶切下来也没有问题，当初导师的意思是先把两个片段T4连接酶连到一起，然后再连到表达载体上。之前没做过所以也没想到后面会有什么问题，现在已经T4连接，所以下一步是要转化到T载体上，还是连接产物切胶回收 再做连接到表达载体上。。。十分感激！！！
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1楼 2017-09-18 09:48:52
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tt121kl

木虫 (著名写手)

新闻不联播
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
片段 和载体分别酶切，胶回收，连接，转化

发自小木虫Android客户端
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越努力越幸运
2楼2017-09-18 13:16:10
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123高群

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以试试无缝克隆 挺好用的
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3楼2017-12-20 17:10:52
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