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第四氪星球

新虫 (初入文坛)

[交流] 分子克隆,片段分段扩增,求助 已有2人参与

现在想在拟南芥上克隆一段3K的片段,由于片段太长,导师建议分段扩增,片段中间选一个单一的酶切位点,设计引物跨酶切位点,现在两个片段都已经扩出来了,并且连到T载体上测序正确,酶切下来也没有问题,当初导师的意思是先把两个片段T4连接酶连到一起,然后再连到表达载体上。之前没做过所以也没想到后面会有什么问题,现在已经T4连接,所以下一步是要转化到T载体上,还是连接产物切胶回收 再做连接到表达载体上。。。十分感激!!!
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tt121kl

木虫 (著名写手)

新闻不联播


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
片段 和载体分别酶切,胶回收,连接,转化

发自小木虫Android客户端
越努力越幸运
2楼2017-09-18 13:16:10
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123高群

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以试试无缝克隆 挺好用的
3楼2017-12-20 17:10:52
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