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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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FlashTuna

新虫 (小有名气)

[求助] DNA降解严重，求各位大佬指导。 已有1人参与

新生刚入学一周，望各位大佬莫嫌弃。
提小丑鱼总DNA，这是两天的，以前提的有出来过，但是浓度太低，这两次特意提高获取浓度的。
左边两个是昨天的，左1是肌肉，其他都是尾鳍。后面三个是今天的。我怀疑是电泳问题，毕竟太壮观，师兄说是降解。胶是0.2g+20ml+2ulGV-Ⅱ，电压230，跑了24min。
今天早上测了左边两个的分光光度，260/280大约2.4，左二浓度184ng/ul。
用的都是Tiangen试剂盒。我怀疑过冻融原因，但是今天提的是马上测的，感觉又不是。今天提的时候，加proteinase K后水浴没注意用70℃半小时，后来重新加了enzyme再水浴56的。之后应该没什么问题。
如果降解了，请问大佬们这种情况可能是什么原因造成嗯？？多谢啦。

DNA降解严重，求各位大佬指导。


DNA降解严重，求各位大佬指导。-1


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1楼 2017-09-16 00:29:32
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zhouxfd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-16 22:44:26
有些生物就是很难提出一条带的DNA来，如果是做PCR，我觉得不需要很高质量的DNA样品。用不同的方法提的带型也不一样，以前我用液氮研磨（真菌）可以提出一条带的来，用试剂盒提不出来
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2楼2017-09-16 00:56:01
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FlashTuna

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxfd at 2017-09-16 00:56:01
有些生物就是很难提出一条带的DNA来，如果是做PCR，我觉得不需要很高质量的DNA样品。用不同的方法提的带型也不一样，以前我用液氮研磨（真菌）可以提出一条带的来，用试剂盒提不出来

我这个是用来构建文库的，好像与启动子有关。老师很忙，先让我把DNA弄好的…

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3楼2017-09-16 01:02:24
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zhouxfd

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by FlashTuna at 2017-09-16 01:02:24
我这个是用来构建文库的，好像与启动子有关。老师很忙，先让我把DNA弄好的…
...

多用几种不同的方法试试，看能不能改善
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4楼2017-09-16 01:05:46
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子非鱼_

至尊木虫 (著名写手)
从marker 看跟电泳没关系吧，可以换好点的试剂盒

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生命不息，奋斗不止。
5楼2017-09-16 01:09:57
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fengduyanyu

新虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-16 22:44:44
参照没问题，排除胶的问题，只有你的提的DNA问题，

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6楼2017-09-16 12:29:09
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