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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 双酶切
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红木深衣

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做双酶切时选共同buffer，buffer效率不能低于多少？promega的内切酶，buffer是10*的，那加一种共同buffer是要加双倍吗，按5*来稀释？还有就是有没有哪些内切酶是不能一起用的，即使能找到共同的buffer

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1楼 2017-09-15 15:59:30
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rongyujing

新虫 (初入文坛)
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为什么我看不到回复........
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12楼2017-11-13 18:31:55
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惟珏sole

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
想看回复呢(?_?)

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13楼2019-05-27 11:16:16
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眺望爱

铜虫 (初入文坛)
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西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-05-30 22:24:25
当然不是了，如果只是酶切的话，buff是一样的话就按照一定浓度来，任何buff都要稀释为一倍来用，两个酶加进去只要稀释到一倍了也可以用，酶和酶没什么冲突，至少我没遇到过，但是酶切位点如果在基因上有共用碱基，最好还是分两次切。千万不要稀释5倍，buff工作原理是盐离子的浓度，酶要在适合的盐离子浓度下才能工作。浓了效率会下降。哦对了，还有要注意酶的工作温度，如果温度是50度甚至80度要分开切的!

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14楼2019-05-30 16:33:37
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pandongzi2楼
2017-09-15 15:59   回复  
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4182362853楼
2017-09-15 16:00   回复  
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pan2104楼
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xjh1990895楼
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思平6楼
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wanwlzwj7楼
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mmfyq8楼
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来啊，学习9楼
2017-09-15 16:04   回复  
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爽爽比比10楼
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小乔低调11楼
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