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mayazhm_0

新虫 (初入文坛)

[求助] 鸡血提DNA 已有1人参与

提DNA不是有降解就是提不出,说一下步骤想请大家看看有什么问题。前面好说,主要就是加了裂解液以后吹散沉淀,再离心啥的,然后最后加了SDS和蛋白酶K以后消化过夜。消化后面的就是加两次饱和酚,一次苯氯醇,一次氯醇,都是取上清,摇床10分钟离心10分钟。然后加了无水乙醇后摇床加离心,沉淀漂洗什么的。DNA溶解1到3天都可能,但是送检测DNA几乎都不合格。后来问了另一个实验室的,消化完后面改成了加三次苯氯醇,手动颠倒20次左右,然后静置15min,离心15分钟。然后在加了无水乙醇后手动晃一会,絮状沉淀用枪头挑到新的ep管里。之后一样。但是结果能出絮状沉淀的特别少。我现在特别纠结,因为这些DNA是要送去测序的,到底我是步出问题了

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elmanbio

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

看你这操作步骤可是真的够费劲的啊,直接用试剂盒不就可以了啊?如果量大也可以考虑全自动的机器来做,省时省力,何必这么折腾啊
2楼2017-10-09 16:40:11
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书中日月长

新虫 (初入文坛)

鸡血红细胞提DNA,可以尝试用TAKARA试剂盒提取,个人觉得效果不错
3楼2018-03-10 21:59:23
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