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zzqian0351铁虫 (初入文坛)
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[求助]
求助：发酵中蛋白表达量正常但酶活很低
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| 如题，目的蛋白序列从NCBI中获得且测序正确，原核来源，在大肠杆菌中表达时蛋白的表达量很多，但与其他几种同类型的酶或文献报道中的该酶相比相差很大，酶活非常低，达不到可应用研究的水平。目前发酵优化（包括诱导剂浓度、诱导温度和时间、培养基成分）没有任何提高酶活及蛋白表达量的效果，换过几种载体也没能提高酶活，咨询过密码子优化，但几次的结果都是没必要进行优化（CAI、FOP和GC比例没有太大问题）。求教各位大神，接下来还能从哪些方面入手来提高酶活呢？或者有哪些方法可以提高蛋白表达量？ |
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