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lnlnln

木虫 (正式写手)

[求助] 蛋白类物质冻干

冻干一种蛋白,使用的保护剂主要是BSA和甘露醇。预冻是放置-80℃冰箱2h,再转移至冷冻干燥机中。
最近几次发现按照程序升华干燥时出现冻干瓶中整个物料被抽到瓶中间(并不是刚开始开真空泵就出现这种情况,是冻干一段时间后出现),最后整个物料出现萎缩,坍塌。请问这是什么情况导致的呢?
升华干燥隔板温度主要是设置在-23℃,没有测过共晶点。
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ccs411

木虫 (正式写手)


lnlnln: 回帖置顶 2017-09-12 17:29:10
几个问题:1.从-80度冰箱放到冻干箱里,有没有再次冷冻?什么温度,多久时间?2.升华开始,第一步升华,从多少度升到多少度?升温时间多久?3.升华阶段真空度控制在什么范围?

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3楼2017-09-12 17:22:05
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corry2013

铜虫 (小有名气)

只要干了就行了,不影响吧

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2楼2017-09-12 16:54:17
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lnlnln

木虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by ccs411 at 2017-09-12 17:22:05
几个问题:1.从-80度冰箱放到冻干箱里,有没有再次冷冻?什么温度,多久时间?2.升华开始,第一步升华,从多少度升到多少度?升温时间多久?3.升华阶段真空度控制在什么范围?
...

1.从-80℃冰箱拿出后放到冻干箱中(冻干箱提前开温度达到-30℃)后放置1h后开始升华干燥。
2.第一步升华温度是-30℃,1h,然后变为-25℃,维持4h。升温时间控制不了。(工程师建议我们是升华第一阶段温度和预冻温度一致)
3.升华阶段真空室在30-100Pa之间,仪器自己调节,人为不能控制。
4楼2017-09-12 17:27:51
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lnlnln

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by corry2013 at 2017-09-12 16:54:17
只要干了就行了,不影响吧

一点形状都没有咯,冻干的基本要求之一就是要有好的外形呀。
5楼2017-09-12 17:28:34
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ccs411

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lnlnln at 2017-09-12 17:27:51
1.从-80℃冰箱拿出后放到冻干箱中(冻干箱提前开温度达到-30℃)后放置1h后开始升华干燥。
2.第一步升华温度是-30℃,1h,然后变为-25℃,维持4h。升温时间控制不了。(工程师建议我们是升华第一阶段温度和预冻温 ...

1、从-80度取出到冻干箱的时间间隔多久?放入-30度的冻干箱,保温1小时,个人觉得有点短了。(如果制品有点融化,时间就显得短了。给个参考吧:一般在制品温度达到-45度之后保温3-4小时)。
2、真空度有点差,给个参考:一般在30pa以内,最差也不超过50pa。
3、以前按照整个程序冻干过这个样品吗?如果没动过,考虑一下第一步的升华温度,以及每个升华温度的升温时间(注意不是保温时间)。

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6楼2017-09-13 08:58:04
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ccs411

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ccs411 at 2017-09-13 08:58:04
1、从-80度取出到冻干箱的时间间隔多久?放入-30度的冻干箱,保温1小时,个人觉得有点短了。(如果制品有点融化,时间就显得短了。给个参考吧:一般在制品温度达到-45度之后保温3-4小时)。
2、真空度有点差,给个 ...

如果真空度不能控制,那就控制好升华阶段的温度和时间

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7楼2017-09-13 08:59:13
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lnlnln

木虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by ccs411 at 2017-09-13 08:58:04
1、从-80度取出到冻干箱的时间间隔多久?放入-30度的冻干箱,保温1小时,个人觉得有点短了。(如果制品有点融化,时间就显得短了。给个参考吧:一般在制品温度达到-45度之后保温3-4小时)。
2、真空度有点差,给个 ...

谢谢您的建议。还有个问题想请教下:物料整个被抽到瓶子中间,没有出现鼓泡现象,这个是什么原因呢?是真空度太大了吗?同样的条件冻有时会出现这种情况,有时又不会。
8楼2017-09-14 09:14:37
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lnlnln

木虫 (正式写手)

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引用回帖:
7楼: Originally posted by ccs411 at 2017-09-13 08:59:13
如果真空度不能控制,那就控制好升华阶段的温度和时间
...

好的,谢谢!
9楼2017-09-14 09:15:00
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ccs411

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lnlnln at 2017-09-14 09:14:37
谢谢您的建议。还有个问题想请教下:物料整个被抽到瓶子中间,没有出现鼓泡现象,这个是什么原因呢?是真空度太大了吗?同样的条件冻有时会出现这种情况,有时又不会。...

拍个照片看看,没太明白什么状况。

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10楼2017-09-14 12:34:58
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